Antigénny systém erytrocytov avo. Antigénne krvné systémy Hemolytická choroba novorodenca a krvné skupiny

O systémoch krvných skupín už asi počul každý, no pre väčšinu ľudí sa poznatky končia informáciou o skupinovej nezlučiteľnosti a o tom, že pri transfúzii je možné podať len rovnakú krvnú skupinu. Pre osobu, ktorá nie je spojená s medicínou, tieto znalosti spravidla stačia a pre tých, ktorí sa zaujímajú o vlastnosti systémovej jednotky ABO a dôvody rozdielu medzi skupinami, sa môžete zoznámiť s ďalším materiálom.

Princípy delenia ABO

Systém ABO krvnej skupiny je založený na rozdielnom obsahu aglutinogénov A a B na povrchu erytrocytov a tiež na prítomnosti aglutinínov a a b v plazme.

1. I - erytrocyt nenesie na svojom povrchu aglutinogény, ale oba typy aglutinínov sú obsiahnuté v krvnom obehu. V tomto prípade je krvná skupina ab0 alebo 0 (I). Predpokladá sa, že ide o „najstarší“ typ krvi.
2. II - povrch erytrocytov obsahuje zložku A, pričom v plazme sa zisťuje aglutinín b, označenie bude A (II).
3. III - erytrocyt je nosičom prvku B, zatiaľ čo plazma bude obsahovať len b, a to bude označené ako B (III).
4. IV - na povrchu erytrocytov sa nachádzajú aglutinogény A a B, ale zároveň v plazme nie sú žiadne aglutiníny. Zvyčajne sa označuje AB (IV). Existuje názor, že ide o „najmladšiu“ krv.

Ale kombinácie Aa alebo Bb sa nikdy nevyskytujú.

Vedci budujú teórie o tom, ako je tento systém spojený s psychologickým typom človeka, jeho predispozíciou k určitým patológiám atď.

Prítomnosť aglutinogénov a aglutinínov s rovnakým názvom vždy vyvoláva aglutinačnú reakciu, ktorá vždy končí smrťou.

Práve aglutinácia spôsobuje hemotransfúzny šok, ku ktorému dochádza pri skupinovej inkompatibilite.

Trochu o transfúznom šoku

Aj po objavení ABO systému krvnej skupiny dochádzalo pomerne často ku komplikáciám pri transfúzii krvi, pretože v počiatočných štádiách sa nezohľadňovala hodnota aglutinínov, ale len index aglutenogénu. Predtým sa verilo, že transfúzia krvnej skupiny AB0 alebo ​​0 (I) je povolená pre každého, zatiaľ čo AB (IV) sa môže podávať infúziou iba štvrtej skupine. Táto mylná predstava bola hlavnou príčinou komplikácií po transfúzii krvi.

• aglutinácia (zlepenie) erytrocytov;
• po aglutinácii nastáva hemolýza (deštrukcia) erytrocytu a silné zvýšenie množstva voľného hemoglobínu v plazme;
• zmena zloženia krvi vedie k erytropénii a všeobecná intoxikácia v dôsledku prebytku voľného hemoglobínu.

Tento stav sa nazýva hemotransfúzny šok a často končí smrťou pacienta v dôsledku toho, že je narušené úplné prekrvenie tkanív a telo zažíva ťažkú ​​hypoxiu v dôsledku nedostatku kyslíka. Ako prví trpia podvýživou dôležité orgány- srdce a mozog.

Predtým, ako lekári objavili a študovali krvné skupiny systému ABO, ako aj princípy kompatibility, k úmrtiam pacientov po transfúzii dochádzalo pomerne často v dôsledku hemotransfúzneho šoku, ku ktorému došlo na pozadí masívnej deštrukcie červených krviniek.

Viac informácií o rizikách transfúzie

Ani úplná kompatibilita darcu a príjemcu krvi podľa systému ABO nedáva 100% záruku, že transfúzia krvi prebehne bez komplikácií.

1. Aglutinogény alebo aglutiníny darcu sa svojím zložením veľmi líšia od tých, ktoré majú rovnaký názov u príjemcu a pri požití spôsobujú imunitnú odpoveď. Napriek hlavnému rozdeleniu do skupín je zloženie krvi u každej osoby individuálne, práve tieto individuálne charakteristiky spôsobujú imunologické reakcie počas transfúzie.
2. Výrazný rozdiel v zložení plazmy. Laboratórne štúdie kontrolujú iba pomery hlavných biochemických zložiek, mnohé ukazovatele sa neberú do úvahy. Tento nesúlad môže tiež spôsobiť akútnu imunitnú odpoveď.

Existujú však situácie, keď je potrebná transfúzia pre životné funkcie.

• ťažké formy anémie;
• rozsiahla strata krvi v dôsledku zranení alebo operácií:
• zníženie koagulability;
• onkologické procesy;
• ťažké popáleniny.

1. hmoty erytrocytov. Pripravuje sa z darcovskej krvi a obsahuje len „premyté“ erytrocyty, ktoré nesú minimum informácií o darcovi. Erytrocytová hmota sa používa na liečbu anémie, onkologických procesov krvotvorného systému, alebo pri strate krvi.
2. hmotnosť krvných doštičiek. Krvné doštičky od neosobného darcu sa podávajú transfúziou v prípade porúch zrážanlivosti.
3. hmotnosť leukocytov. Pomáha doplniť počet bielych krviniek onkologické ochorenia spojené s inhibíciou zárodku leukocytov a pri iných stavoch sprevádzaných leukopéniou.
4. Plazma. Infúzia plazmy sa vykonáva hlavne pri ťažkých popáleninách, pri iných ochoreniach sa transfúzia plazmy používa zriedka.

Systém ABO sa používa aj na výber kompatibilných krvných elementov, ale komplikácie spojené s transfúziou krvi sú oveľa menej časté.

Systém krvných skupín ABO je dôležitý pri výbere darcu pre pacienta a znižuje riziko transfúzneho šoku.

Vo všetkých ostatných prípadoch kombinácia aglutinínov a aglutinogénov neovplyvňuje celkový zdravotný stav človeka.

Pojem „krvné skupiny“ sa prvýkrát objavil práve vo vzťahu k antigénnemu systému erytrocytov ABO. V roku 1901 Karl Landsteiner zmiešaním erytrocytov s krvnými sérami rôznych ľudí objavil proces aglutinácie erytrocytov (aglutinácia), a to len pri určitých kombináciách séra a erytrocytov. Teraz každý vie, že existujú 4 krvné skupiny. Na základe čoho možno rozdeliť krv všetkých ľudí na planéte len do 4 skupín. Ukazuje sa to prítomnosťou alebo absenciou iba dvoch antigénov v membráne erytrocytov – Landsteiner tieto antigény nazval antigény A a B. Našli sa 4 varianty prítomnosti týchto antigénov na membráne erytrocytov.

Možnosť ja(Pozor! Krvné skupiny na celom svete sú označené rímskymi číslicami) - membrána erytrocytov neobsahuje antigén A ani antigén B, takáto krv je priradená do skupiny ja a je označený O (I), variant II - erytrocyty obsahujú iba antigén A - druhá skupina A (II), variant III - membrána erytrocytov obsahuje iba antigén B - tretia skupina B (III), membrána erytrocytov ľudí s krvná skupina IV obsahuje oba antigény AB(IV). Približne 45 % Európanov má krvnú skupinu A, približne 40 % - O, 10 % - B a 6 % - AB, a 90 % domorodých obyvateľov Severná Amerika krvná skupina - 0, 20% obyvateľov Strednej Ázie má krvnú skupinu B.

Prečo sa niekedy vyskytne aglutinačná reakcia, keď sa erytrocyty jednej osoby zmiešajú so sérom druhej osoby, a niekedy nie? Faktom je, že krvné sérum obsahuje už „hotové“ protilátky proti antigénom A a B, tieto protilátky sa nazývajú prirodzené. Protilátka je špecifická pre A antigény. α - pri kontakte membrány erytrocytu obsahujúceho antigén A a protilátky α erytrocyty sa zlepia - aglutinačná reakcia, to isté sa pozoruje, keď sa antigén B stretne s protilátkou β. Preto protilátky α aβ sa nazývali aglutiníny. Z toho je zrejmé, že krv obsahujúca antigén A aj protilátku α n e môže existovať, rovnako ako B a β. V krvi tej istej osoby nemôžu byť aglutinogény a aglutiníny rovnakého mena.

Aglutiníny sú rozdelené podľa antigénov nasledovne:

Ako vidíte, normálne nemôže dôjsť k aglutinácii, ale ak je krv druhej skupiny zmiešaná s krvou tretej, potom antigén A, ktorý sa stretol s protilátkou α spôsobí reakciu antigén-protilátka a povedie k aglutinácii erytrocytov, je dobré, ak sa tak stane v skúmavke, pretože v cievach aglutinácia erytrocytov povedie k ich masová smrť, upchávajú kapiláry, spôsobujú intravaskulárnu koaguláciu – táto situácia sa nazýva hemotransfúzny šok a môže mať za následok smrť príjemcu. Preto je také dôležité vedieť určiť krvnú skupinu podľa systému ABO. Aby ste mohli určiť krvnú skupinu podľa tohto systému, stačí detegovať (alebo nezistiť) jeden z dvoch antigénov, prípadne oba spolu. Keďže príroda už pripravila protilátky špecifické pre tieto antigény, nie je ťažké to urobiť, pretože. aglutinačná reakcia je spoľahlivým znakom toho, že došlo k stretnutiu rovnomenného antigénu a protilátky.

KRVNÉ SKUPINY RH SYSTÉMU

Antigény Rh systému: 6 alel 3 génov Rh systému kóduje Ag: c, C, d, D, e, E. Sú v kombináciách napr. CDE / cdE. Celkom je možných 36 kombinácií.

Rh-pozitívna a Rh-negatívna krv:

Ak genotyp konkrétnej osoby kóduje aspoň jedno z Ag C, D a E, krv takejto osoby bude Rh-pozitívna, Rh-negatívne sú len osoby fenotypu cde / cde (rr).

Takže - ak membrána ľudských erytrocytov obsahuje niektorý z antigénov systému Rh, potom sa jeho krv považuje za Rh pozitívnu (v praxi sa za Rh pozitívne považujú osoby, ktoré majú na povrchu erytrocytov silný imunogén Ag D ).

VŠEOBECNÉ USTANOVENIA

Systém krvných skupín ABO pozostáva z dvoch skupinových aglutinogénov, A a B, a dvoch zodpovedajúcich plazmatických aglutinínov, alfa (anti-A) a beta (anti-B). Rôzne kombinácie týchto antigénov a protilátok tvoria štyri krvné skupiny: skupina 0(1) - oba antigény chýbajú; skupina A (II) - na erytrocytoch je prítomný iba antigén A; skupina B(III) - na erytrocytoch je prítomný iba antigén B; skupina AB (IV) - na erytrocytoch sú prítomné antigény A a B.

Jedinečnosť systému ABO spočíva v tom, že v plazme neimunizovaných ľudí sú prirodzené protilátky proti antigénu neprítomné na erytrocytoch: u osôb skupiny 0 (1) - protilátky proti A a B; u osôb skupiny A (II) - anti-B protilátky; u osôb skupiny B (III) - anti-A protilátky; osoby zo skupiny AB(IV) nemajú protilátky proti antigénom systému ABO.

V nasledujúcom texte budú anti-A a anti-B protilátky označované ako anti-A a anti-B.

Stanovenie krvnej skupiny ABO sa vykonáva identifikáciou špecifických antigénov a protilátok (dvojitá alebo krížová reakcia). Anti-A a anti-B sa detegujú v krvnom sére pomocou štandardných erytrocytov A(II) a B(III). Prítomnosť alebo neprítomnosť antigénov A a B na erytrocytoch sa stanoví pomocou monoklonálnych alebo polyklonálnych protilátok (štandardné hemaglutinačné séra) s príslušnou špecifickosťou.

Stanovenie krvnej skupiny sa vykonáva dvakrát: primárna štúdia - v lekárskom oddelení (tím na odber krvi); potvrdzujúce štúdium - na laboratórnom oddelení. Algoritmus na vykonávanie imunohematologických laboratórnych testov počas transfúzie krvi je znázornený na obr. 18.1.

Výsledok stanovenia krvnej skupiny sa zaznamená do pravého horného rohu predného listu anamnézy alebo do denníka (karty) darcu s uvedením dátumu a podpísaný lekárom, ktorý stanovenie vykonal.

Na severozápade Ruska je rozdelenie krvných skupín systému ABO v populácii nasledovné: skupina 0 (I) - 35 %; skupina A(II) - 35-40 %; skupina B(III) - 15-20 %; skupina AB (IV) - 5-10%.

Treba poznamenať, že existujú rôzne druhy(slabé varianty) ako antigén A (in viac), a antigén B. Najbežnejšie typy antigénov A - A 1 a A 2. Prevalencia antigénu A 1 u jedincov skupín A (II) a AB (IV) je 80% a antigénu A2 - asi 20%. Vzorky krvi s A2 môžu obsahovať protilátky anti-A1, ktoré interagujú so štandardnými červenými krvinkami skupiny A (II). Prítomnosť anti-A 1 sa zisťuje krížovým stanovením krvných skupín a počas testu individuálnej kompatibility.

Na diferencované stanovenie variantov antigénu A (A 1 a A 2) je potrebné použiť špecifické reagencie (fytohemaglutiníny alebo monoklonálne protilátky anti-A 1. Pacienti skupín A 2 (II) a A 2 B (IV) potrebujú byť transfúziou hemokomponentov obsahujúcich erytrocyty skupiny A 2 (II) a A 2 B (IV) Môžu sa odporučiť aj transfúzie premytých erytrocytov: 0 (I) - pre pacientov s krvnou skupinou A 2 (II); 0 ( I) a B (III) - pre pacientov s krvnou skupinou A 2 B(II).

Stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO

Krvné skupiny sa stanovujú pomocou štandardných sér (jednoduchá reakcia) a štandardných erytrocytov (dvojitá alebo krížová reakcia).

Krvná skupina sa stanoví jednoduchou reakciou s dvoma sériami štandardných izohemaglutinačných sér.

• Pokrok v definícii [šou] .

  Stanovenie krvnej skupiny sa vykonáva pri dobrom svetle a teplote od + 15 do + 25 ° C na tabletách. Na ľavej strane tabuľky píšu 0 (1), v strede - A (II), ďalej pravá strana- B(III). V strede horného okraja tablety je uvedené meno darcu alebo číslo testovanej krvi. Použite aktívne štandardné séra troch skupín (O, A, B) s titrom aspoň 1:32, dve série. Séra sú umiestnené v špeciálnych stojanoch v dvoch radoch. Každé sérum zodpovedá označenej pipete. Sérová skupina AB(IV) sa používa ako ďalšia kontrola.

  Jedna alebo dve kvapky štandardného séra sa aplikujú na tabletu v dvoch radoch: skupina 0(1) sérum - vľavo, skupina A(II) sérum - v strede, skupina B(III) sérum - vpravo.

  Kvapky krvi z prsta alebo skúmavky sa nanesú pipetou alebo sklenenou tyčinkou do blízkosti každej kvapky séra a premiešajú sa tyčinkou. Množstvo krvi by malo byť 8-10 krát menšie ako sérum. Po premiešaní sa platnička alebo tableta jemne pretrepe v rukách, čo prispieva k rýchlejšiemu a jasnejšiemu zhlukovaniu erytrocytov. Keď dôjde k aglutinácii, ale nie skôr ako po 3 minútach, ku kvapkám séra s erytrocytmi, kde došlo k aglutinácii, sa pridá jedna kvapka 0,9% roztoku chloridu sodného a v pozorovaní sa pokračuje až do uplynutia 5 minút. Po 5 minútach odčítajte reakciu v prechádzajúcom svetle.

  Ak je aglutinácia nejasná, do zmesi séra a krvi sa dodatočne pridá jedna kvapka 0,9% roztoku chloridu sodného, ​​potom sa urobí záver o príslušnosti k skupine (tabuľka 18.4).

• Výsledky reakcie [šou] .
  1. Neprítomnosť aglutinácie vo všetkých troch kvapkách naznačuje, že v testovanej krvi nie je žiadny aglutinogén, to znamená, že krv patrí do skupiny 0(I).
  2. Nástup aglutinácie po kvapkách so sérom 0(I) a B(III) naznačuje, že v krvi je aglutinogén A, to znamená, že krv patrí do skupiny A(II).
  3. Prítomnosť aglutinácie v kvapkách so sérami skupiny 0(I) a A(II) naznačuje, že testovaná krv obsahuje aglutinogén B, teda krv skupiny B(III).
  4. Aglutinácia vo všetkých troch kvapkách indikuje prítomnosť aglutinogénov A a B v testovanej krvi, to znamená, že krv patrí do skupiny AB (IV). Avšak v tomto prípade, vzhľadom na to, že aglutinácia so všetkými sérami je možná v dôsledku nešpecifickej reakcie, je potrebné aplikovať dve alebo tri kvapky štandardného AB(IV) séra na tabletu alebo doštičku a pridať 1 kvapku testu krv k nim. Sérum a krv sa zmiešajú a výsledok reakcie sa pozoruje do 5 minút.

     Ak nedošlo k aglutinácii, potom sa testovaná krv zaradí do skupiny AB(IV). Ak sa objaví aglutinácia so sérom skupiny AB (IV), potom je reakcia nešpecifická. V prípade slabej aglutinácie a vo všetkých pochybných prípadoch sa krv znovu testuje štandardnými sérami z iných sérií.

Stanovenie krvnej skupiny ABO dvojitou reakciou
(podľa štandardných sér a štandardných erytrocytov)

Štandardné erytrocyty sú 10-20 % suspenzia čerstvých natívnych erytrocytov (alebo testovacích buniek premytých z konzervačnej látky) skupín 0 (I), A (II) a B (III) v 0,9 % roztoku chloridu sodného alebo citrátovo-fyziologického roztoku. Natívne štandardné erytrocyty sa môžu použiť do 2-3 dní, ak sa uchovávajú v izotonickom fyziologickom roztoku pri +4 °C. Konzervované štandardné erytrocyty sa uchovávajú pri +4 °C počas 2 mesiacov a pred použitím sa umyjú z konzervačného roztoku.

Ampulky alebo fľaštičky so štandardnými sérami a štandardnými erytrocytmi sa umiestnia do špeciálnych stojanov s príslušným označením. Na prácu s typovacími činidlami sa používajú suché, čisté pipety, pre každé činidlo samostatné. Na umývanie sklenených (plastových) tyčiniek a pipiet pripravte poháre s 0,9% roztokom chloridu sodného.

Na určenie skupiny sa odoberie 3-5 ml krvi do skúmavky bez stabilizátora. Krv by mala stáť 1,5-2 hodiny pri teplote + 15-25 ° C.

• Pokrok v definícii [šou] .

  Do tablety sa aplikujú dve kvapky (0,1 ml) štandardných sér skupín 0(I), A(II), B(III) dvoch sérií. V súlade s tým sa do každej skupiny sér umiestni jedna malá kvapka (0,01 ml) štandardných erytrocytov skupín 0(I), A(II), B(III). Jedna kvapka testovanej krvi sa pridá do štandardného séra a dve kvapky testovacieho séra sa pridajú do štandardných erytrocytov. Množstvo krvi by malo byť 8-10 krát menšie ako sérum. Kvapky sa zmiešajú so sklenenou tyčinkou a 5 minút pretrepávaním tablety v rukách sa sleduje začiatok aglutinácie. Ak je aglutinácia nejasná, do zmesi séra a krvi sa dodatočne pridá jedna kvapka 0,9% roztoku chloridu sodného (0,1 ml), potom sa urobí záver o príslušnosti k skupine (tabuľka 18.4).

• Vyhodnotenie výsledkov stanovenia krvnej skupiny systému ABO [šou] .
  1. Prítomnosť aglutinácie so štandardnými erytrocytmi A a B a neprítomnosť aglutinácie v troch štandardných sérach dvoch sérií naznačuje, že v testovacom sére sú prítomné obidva aglutiníny, alfa aj beta, a že v testovaných erytrocytoch nie sú žiadne aglutinogény, tj. , krv patrí do skupiny 0 (I) .
  2. Prítomnosť aglutinácie so štandardnými sérami skupín 0(I), B(III) a so štandardnými erytrocytmi skupiny B(III) naznačuje, že študované erytrocyty obsahujú aglutinogén A a študované sérum obsahuje aglutinín beta. Preto krv patrí do skupiny A(II).
  3. Prítomnosť aglutinácie so štandardnými sérami skupín 0 (I), A (II) a so štandardnými erytrocytmi skupiny A (II) naznačuje, že študované erytrocyty obsahujú aglutinogén B a študované sérum obsahuje aglutinín alfa. Preto krv patrí do skupiny B(III).
  4. Prítomnosť aglutinácie so všetkými štandardnými sérami a neprítomnosť aglutinácie so všetkými štandardnými erytrocytmi naznačuje, že v skúmaných erytrocytoch sú prítomné oba aglutiníny, to znamená, že krv patrí do skupiny AB(IV).

Stanovenie krvnej skupiny
s použitím anti-A a anti-B koliklonov

Zoliklony anti-A a anti-B (monoklonálne protilátky proti antigénom A a B) sú určené na stanovenie krvnej skupiny ľudského ABO systému namiesto štandardných izohemaglutinačných sér. Pre každú krvnú skupinu sa použije jedna šarža reagencií anti-A a anti-B.

• Pokrok v definícii [šou] .

  Jedna veľká kvapka anti-A a anti-B tsoliclonov (0,1 ml) sa aplikuje na tabletu (doštičku) pod príslušnými nápismi: "Anti-A" alebo "Anti-B". Vedľa sa dá jedna malá kvapka testovanej krvi (pomer krvného činidla je 1:10), potom sa činidlo a krv zmiešajú a jemným kývaním platničky alebo platničky sa sleduje priebeh reakcie.

  Aglutinácia s anti-A a anti-B koliklonmi sa zvyčajne vyskytuje počas prvých 5-10 sekúnd. Pozorovanie by sa malo vykonávať 2,5 minúty kvôli možnosti neskoršieho nástupu aglutinácie s erytrocytmi obsahujúcimi slabé odrody antigénov A alebo B.

• Vyhodnotenie výsledkov aglutinačnej reakcie s anti-A a anti-B koloklonmi je uvedené v tabuľke. 18.4, ktorý obsahuje aj výsledky stanovenia aglutinínov v sére darcov pomocou štandardných erytrocytov.

Ak je podozrenie na spontánnu aglutináciu u osôb s krvnou skupinou AB(IV), vykoná sa kontrolná štúdia s 0,9 % roztokom chloridu sodného. Odpoveď musí byť negatívna.

Zoliklony anti-A (ružové) a anti-B (modré) sú dostupné v natívnej aj lyofilizovanej forme v ampulkách s 20, 50, 100 a 200 dávkami s rozpúšťadlom pripojeným ku každej ampulke, 2, 5, 10, 20 ml v tomto poradí .

Doplnkovou kontrolou správnosti stanovenia krvnej skupiny ABO s činidlami anti-A a anti-B je monoklonálne činidlo anti-AB (gematológ, Moskva). Odporúča sa používať anti-AB činidlo súbežne s imunopolyklonálnymi sérami a monoklonálnymi činidlami. V dôsledku reakcie s anti-AB činidlom sa vyvinie aglutinácia erytrocytov skupín A (II), B (III) a AB (IV); erytrocyty skupiny 0(I) nemajú žiadnu aglutináciu.

CHYBY PRI URČOVANÍ SKUPINOVÉHO DOPLNKU

Chyby pri určovaní krvných skupín môžu závisieť od troch dôvodov:

1. technické;
2. menejcennosť štandardných sér a štandardných erytrocytov;
3. biologické vlastnosti testovaná krv.

Technické chyby zahŕňajú:

• ale) nesprávne umiestnenie séra na tablete;
• b) nesprávne kvantitatívne pomery sér a erytrocytov;
• c) používanie nedostatočne čistých tabliet a iných predmetov, ktoré sú v kontakte s krvou. Pre každé sérum by mala byť samostatná pipeta; na umývanie pipiet by sa mal použiť iba 0,9% roztok chloridu sodného;
• d) nesprávny záznam skúmanej krvi;
• e) nedodržanie času stanoveného pre aglutinačnú reakciu; v prípade náhlenia, keď sa reakcia zohľadní pred uplynutím 5 minút, nemusí dôjsť k aglutinácii, ak sú v testovanej krvi slabé aglutinogény; ak je reakcia preexponovaná na viac ako 5 minút, môže dôjsť k vysychaniu kvapiek z okrajov, čo simuluje aglutináciu, čo tiež povedie k chybnému záveru;
• f) nedostatok aglutinácie v dôsledku vysokej (nad 25 °C) okolitej teploty. Aby sa predišlo tejto chybe, je vhodné použiť špeciálne pripravené séra na prácu v horúcom podnebí; na stanovenie krvných skupín na tanieri alebo plastovom podnose, ktorého vonkajší povrch dna sa spustí do studenej vody.
• g) nesprávne odstreďovanie: nedostatočné odstreďovanie môže viesť k falošne negatívnemu výsledku a nadmerné odstreďovanie môže viesť k falošne pozitívnemu výsledku.

Chyby v závislosti od použitia defektných štandardných sér a štandardných erytrocytov:

• a) slabé štandardné séra s titrom nižším ako 1:32 alebo s platnosť vypršala vhodnosť môže spôsobiť neskorú a slabú aglutináciu;
• b) použitie nevhodných štandardných sér alebo erytrocytov, ktoré boli pripravené nesterilne a nedostatočne konzervované, vedie k vzniku nešpecifickej „bakteriálnej“ aglutinácie.

Chyby v závislosti od biologických charakteristík testovanej krvi:

Chyby v závislosti od biologických charakteristík študovaných erytrocytov:

• a) neskorá a slabá aglutinácia je spôsobená "slabými" formami antigénov, erytrocytmi, častejšie - prítomnosťou slabého aglutinogénu A 2 v skupinách A a AB. Zároveň v prípade stanovenia krvnej skupiny bez vyšetrenia séra na prítomnosť aglutinínov (jednoduchá reakcia) možno pozorovať chyby, kvôli ktorým je krv skupiny A 2 B definovaná ako skupina B (III) a krv A2 - ako skupina 0 (I). Preto, aby sa predišlo chybám, stanovenie krvnej skupiny darcov aj príjemcov sa musí vykonať pomocou štandardných erytrocytov (dvojitá alebo krížová reakcia). Na identifikáciu aglutinogénu A 2 sa odporúča zopakovať štúdiu s inými typmi (sériami) činidiel s použitím iného laboratórneho skla, s predĺžením času registrácie reakcie.

  Špecifické reagencie na objasnenie krvnej skupiny v prítomnosti slabých variantov antigénu A (A 1, A 2, A 3) metódou priamej aglutinačnej reakcie sú anti-A sl a anti-A činidlo).

• b) "panaglutinácia" alebo "autoaglutinácia", to znamená schopnosť krvi poskytnúť rovnakú nešpecifickú aglutináciu so všetkými sérami a dokonca aj so svojimi vlastnými. Intenzita takejto reakcie po 5 minútach zoslabne, pričom skutočná aglutinácia sa zvýši. Najčastejšie sa vyskytuje u hematologických, onkologických pacientov, popálených pacientov a pod. Pre kontrolu sa odporúča posúdiť, či v štandardnom sére skupiny AB (IV) a fyziologickom roztoku dochádza k aglutinácii testovaných erytrocytov.

  Krvnú skupinu pri "panaglutinácii" možno určiť po trojnásobnom premytí erytrocytov. Na elimináciu nešpecifickej aglutinácie sa tableta vloží na 5 minút do termostatu pri teplote +37°C, potom nešpecifická aglutinácia zmizne, ale tá pravá zostane. Je vhodné zopakovať stanovenie pomocou monoklonálnych protilátok, Coombsov test.

  V prípade, že premytie erytrocytov neprinesie požadovaný výsledok, je potrebné znovu odobrať vzorku krvi do predhriatej skúmavky, vzorku vložiť do termonádoby na udržanie teploty +37°C a dodať do laboratória na analýzu. Stanovenie krvnej skupiny sa musí vykonať pri teplote +37 ° C, na ktorú sa používajú predhriate činidlá, fyziologický roztok a tableta.

• c) erytrocyty testovanej krvi sú poskladané do „stĺpcov mincí“, ktoré je možné pri makroskopickom vyšetrení zameniť za aglutináty. Pridanie 1-2 kvapiek izotonického roztoku chloridu sodného, ​​po ktorom nasleduje jemné kývanie tabletou, zvyčajne zničí rouleaux.
• d) zmiešaná alebo neúplná aglutinácia: niektoré erytrocyty aglutinujú a niektoré zostávajú voľné. Pozoruje sa u pacientov skupín A(II), B(III) a AB(IV) po transplantácii kostnej drene alebo počas prvých troch mesiacov po transfúzii krvi skupiny 0(I). Heterogenita erytrocytov periférnej krvi je jasne overená v gélovom teste DiaMed.

Chyby v závislosti od biologických charakteristík študovaného séra:

• a) detekcia protilátok inej špecifickosti pri rutinnom testovaní je výsledkom predchádzajúcej senzibilizácie. Je vhodné stanoviť špecifickosť protilátok a vybrať typizované erytrocyty bez antigénu, na ktorý bola imunizácia zistená. Imunizovaný príjemca musí individuálne vybrať kompatibilnú darcovskú krv;
• b) v prípade tvorby „stĺpcov mincí“ štandardných erytrocytov v prítomnosti testovacieho séra sa odporúča potvrdiť abnormálny výsledok pomocou štandardných erytrocytov skupiny 0 (I). Na rozlíšenie „stĺpcov peňazí“ a pravých aglutinátov pridajte 1-2 kvapky izotonického roztoku chloridu sodného a pretrepte tabletu, kým sa „stĺpce peňazí“ zničia;
• c) neprítomnosť protilátok anti-A alebo anti-B. Možno u novorodencov a pacientov s potlačenou humorálnou imunitou;
celkový počet strán: 10

LITERATÚRA [šou] .

1. Imunologická selekcia darcu a príjemcu pri transfúziách krvi, jej zložiek a transplantácii kostnej drene / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. a iné - Leningrad, 1979. - 29 s.
2. Kaleko S. P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G. P. a kol. Allosenzibilizácia v hemokomponentnej terapii a optimalizácia výberu histokompatibilných párov darca-príjemca v armáde zdravotnícke zariadenia/ Metodický. odporúčania.- Petrohrad, 1994. - 16 s.
3. Praktická transfuziológia / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. atď. - Moskva: Triada-T, 1996. - 435 s.
4. Sprievodca vojenskou transfuziológiou / Ed. E. A. Nechajev. - Moskva, 1991. - 280 s.
5. Sprievodca transfúziou / Ed. E. P. Svedentsová. - Kirov, 1999.- 716s.
6. Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Klinická transfuziológia.- M.: GEOTAR MEDICINE, 1997.- 575 s.
7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Bezpečná transfúzia krvi: Sprievodca pre lekárov - Petrohrad: Peter, 2000. - 320 s.
8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Imunologická a infekčná bezpečnosť hemokomponentnej terapie - Petrohrad: Nauka, 1998. - 232 s.
9. Schiffman F.J. Patofyziológia krvi / Per. z angličtiny - M. - Petrohrad: Vydavateľstvo BINOM - Nevsky dialekt, 2000. - 448 s.
10. Krvná transfúzia v klinickej medicíne / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras. - Oxford, 1988. - 1233 s.

Zdroj: Lekárska laboratórna diagnostika programy a algoritmy. Ed. Prednášal prof. Karpishchenko A.I., Petrohrad, Intermedica, 2001

Náuka o krvných skupinách vznikla z potrieb klinickej medicíny. Pri transfúzii krvi zo zvierat na ľudí alebo z ľudí na ľudí lekári často pozorovali ťažké komplikácie, niekedy končiace smrťou príjemcu.

S objavom krvných skupín viedenským lekárom K. Landsteinerom (1901) sa ukázalo, prečo sú krvné transfúzie v niektorých prípadoch úspešné, v iných sa končia pre pacienta tragicky. K. Landsteiner prvýkrát objavil, že plazma alebo sérum niektorých ľudí je schopné aglutinovať (zlepiť sa) erytrocyty iných ľudí. Tento jav sa nazýva izohemaglutinácia. Je založená na prítomnosti antigénov nazývaných aglutinogény a označovaných písmenami A a B v erytrocytoch a v plazme - prirodzených protilátok alebo aglutinínov, nazývaných a a b. Aglutinácia erytrocytov sa pozoruje iba vtedy, ak sú prítomné aglutinogén a aglutinín s rovnakým názvom: A a α, B a β.

Zistilo sa, že aglutiníny ako prirodzené protilátky (AT) majú dve väzbové centrá, a preto je jedna molekula aglutinínu schopná tvoriť most medzi dvoma erytrocytmi. V tomto prípade môže každý z erytrocytov za účasti aglutinínov kontaktovať susedný, čím vzniká konglomerát (aglutinát) erytrocytov.

V krvi tej istej osoby nemôžu byť aglutinogény a aglutiníny rovnakého mena, pretože v opačnom prípade by došlo k hromadnej aglutinácii erytrocytov, ktorá je nezlučiteľná so životom. Možné sú len štyri kombinácie, v ktorých sa nevyskytujú aglutinogény a aglutiníny rovnakého názvu, alebo štyri krvné skupiny: I - 0 (αβ), II - A (β), III - B (α), IV - AB (0 ).

Krv okrem aglutinínov, plazmy alebo séra obsahuje hemolyzíny, sú tiež dvojakého druhu a označujú sa podobne ako aglutiníny písmenami α a β. Pri stretnutí aglutinogénu a hemolyzínu s rovnakým názvom dochádza k hemolýze erytrocytov. Pôsobenie hemolyzínov sa prejavuje pri teplote 37-40°C. To je dôvod, prečo pri transfúzii nekompatibilnej krvi u človeka dochádza po 30-40 sekundách k hemolýze erytrocytov. Ak sa pri izbovej teplote vyskytujú aglutinogény a aglutiníny s rovnakým názvom, dochádza k aglutinácii, ale nepozoruje sa žiadna hemolýza.

V plazme ľudí s krvnými skupinami II, III, IV sú antiaglutinogény, ktoré opustili erytrocyty a tkanivá. Označujú sa podobne ako aglutinogény písmenami A a B.

Sérologické zloženie hlavných krvných skupín (systém ABO)

Ako je zrejmé z tabuľky nižšie, krvná skupina I nemá aglutinogény, a preto je podľa medzinárodnej klasifikácie označovaná ako skupina 0, II - nazýva sa A, III - B, IV - AB.

Na vyriešenie otázky kompatibility krvných skupín sa používa nasledovné pravidlo: prostredie príjemcu musí byť vhodné pre život erytrocytov darcu (osoby, ktorá daruje krv). Plazma je také médium, preto by príjemca mal brať do úvahy aglutiníny a hemolyzíny v plazme a darca by mal brať do úvahy aglutinogény obsiahnuté v erytrocytoch. Na vyriešenie problému kompatibility krvných skupín sa testovaná krv zmieša so sérom získaným od ľudí s rôznymi krvnými skupinami. Aglutinácia nastáva, keď sa sérum skupiny I zmieša s erytrocytmi skupín II, III a IV, sérum skupiny II - s erytrocytmi skupín III a IV, sérum skupiny III - s erytrocytmi skupín 11 a IV.

Preto je krv typu I kompatibilná so všetkými ostatnými krvnými skupinami, takže človek, ktorý má krv typu I, sa nazýva univerzálny darca. Na druhej strane erytrocyty

Krvné skupiny IV by nemali spôsobovať aglutinačné reakcie pri zmiešaní s plazmou (sérom) ľudí s akoukoľvek krvnou skupinou, preto sa ľudia s krvnou skupinou IV nazývajú univerzálni príjemcovia.

Prečo pri rozhodovaní o kompatibilite nebrať do úvahy aglutiníny a hemolyzíny darcu? Je to spôsobené tým, že aglutiníny a hemolyzíny sa pri transfúzii malých dávok krvi (200 – 300 ml) zriedia vo veľkom objeme plazmy (2 500 – 2 800 ml) príjemcu a sú viazané jeho antiaglutinínmi a preto by nemal predstavovať nebezpečenstvo pre erytrocyty.

V každodennej praxi sa na vyriešenie otázky typu transfúzovanej krvi používa iné pravidlo: krv jednej skupiny by sa mala transfúzovať a len zo zdravotných dôvodov, keď človek stratil veľa krvi. Len pri absencii jednoskupinovej krvi, s veľkou opatrnosťou, môže byť transfúzované malé množstvo kompatibilnej krvi. Vysvetľuje sa to tým, že približne 10-20% ľudí má vysokú koncentráciu veľmi aktívnych aglutinínov a hemolyzínov, ktoré sa nedajú viazať antiaglutinínmi ani v prípade transfúzie malého množstva krvi inej skupiny.

Potransfúzne komplikácie niekedy vznikajú v dôsledku chýb pri určovaní krvných skupín. Zistilo sa, že aglutinogény A a B existujú v rôznych variantoch, ktoré sa líšia svojou štruktúrou a antigénnou aktivitou. Väčšina z nich dostala digitálne označenie (A 1 , A 2 , A 3 atď., B 1 , B 2 atď.). Čím vyššie je sériové číslo aglutinogénu, tým menšiu aktivitu vykazuje. Aj keď sú aglutinogény A a B relatívne zriedkavé, nemusia byť zistené pri určovaní krvných skupín, čo môže viesť k nekompatibilným transfúziám krvi.

Treba tiež vziať do úvahy, že väčšina ľudských erytrocytov nesie antigén H. Tento antigén je vždy na povrchu bunkových membrán u ľudí s krvnou skupinou 0 a je prítomný aj ako latentný determinant na bunkách ľudí s krvnou skupinou A. , B a AB. H je antigén, z ktorého sa tvoria antigény A a B. U ľudí s krvnou skupinou 1 je antigén dostupný pôsobeniu protilátok anti-H, ktoré sú celkom bežné u ľudí s krvnou skupinou II a IV a relatívne zriedkavé u ľudí so skupinou III. Táto okolnosť môže spôsobiť komplikácie pri transfúzii krvi pri transfúzii krvi 1. skupiny ľuďom s inými krvnými skupinami.

Koncentrácia aglutinogénov na povrchu membrány erytrocytov je extrémne vysoká. Takže jeden erytrocyt krvnej skupiny A 1 obsahuje v priemere 900 000 až 1 700 000 antigénnych determinantov alebo receptorov k aglutinínom rovnakého mena. S nárastom atómového čísla aglutinogénu počet takýchto determinantov klesá. Erytrocyty skupiny A² majú len 250 000 – 260 000 antigénnych determinantov, čo tiež vysvetľuje nižšiu aktivitu tohto aglutinogénu.

V súčasnosti sa ABO systém často označuje ako AVN a namiesto pojmov „aglutinogény“ a „aglutiníny“ sa používajú výrazy „antigény“ a „protilátky“ (napríklad AVH antigény a AVH protilátky).

Antigénny systém ABO má veľký význam pre kompatibilitu krvi počas transfúzie.
Pod pojmom "kompatibilita" sa rozumie kombinácia krvi darcu a príjemcu z hľadiska antigénov a protilátok, ktorá nespôsobuje imunologické interakcie.

zriedkavý anglutinogén A2. V súlade s tým má skupina A (II) dve podskupiny A (II) a A2 (II) a skupinu AB (IV) - AB (IV) a A2B (IV) (tabuľka 6.1).
Tabuľka 6.1
Krvné skupiny podľa systému ABO

Aglutinogény Aj a A2 sa navzájom líšia vlastnosťami:

• Subtyp A má v porovnaní s aglutinogénom A2 väčšiu adsorpčnú kapacitu, silnejšie adsorbuje aglutinín a zo séra, preto sa nazýva silný a podtyp A2 sa nazýva slabý.
• Erytrocyty s A2 aglutinogénom majú nižšiu aglutinovateľnosť.
• Podskupiny s aglutinogénmi Aj a A2 majú tiež odlišné vlastnosti séra. Sérum podskupín A2 (P) a A2B (IV) pomerne často obsahuje aglutinín, nazývaný Landsteiner a Levin extra-aglutinín ap, ktorý aglutinuje iba s erytrocytmi Aj a neaglutinuje s erytrocytmi A2. Súčasne v sére podskupiny A (II) a AB (IV) je pomerne zriedkavý, ale nachádza sa extraaglutinín a2, ktorý neaglutinuje s erytrocytmi Aj, ale dáva aglutináciu s erytrocytmi A2.

1. PODTYPY ANTIGÉNU B

1. ANTIGÉN O A LÁTKA H

1. KRVI CHIMERS