Reguli de acceptare a înregistrării depozitării biomaterialului. Sop recepția biomaterialului - managementul calității în sectorul sănătății. Recepția biomaterialului în laborator

Reguli pentru preluarea, depozitarea și transportul biomaterialului

Pentru a identifica agenții patogeni Metoda PCR

1.1.1. Biomaterialul este preluat din habitatul suspectat al microorganismelor și dezvoltarea infecției.

1.1.2. Cantitatea de material colectată trebuie să fie mică. Excesul de descărcare, mucusul și puroiul afectează negativ calitatea extracției ADN-ului și contribuie la degradarea ADN-ului în timpul depozitării și transportului.

1.1.3. Când se introduce biomaterial prelevat de la un pacient cu o sondă cu un tampon de vată sau o perie într-un tub Eppendorf cu soluție tampon, necesar:

Mentine sterilitatea;

Înainte de a scufunda biomaterialul colectat pe tampon (perie) în soluție, ungeți-l pe peretele uscat al eprubetei, apoi umeziți tamponul (peria) în soluție și, rotind sonda, clătiți bine tot materialul din peretele eprubetei și tamponul (peria);

Dacă este posibil, strângeți tamponul de peretele eprubetei, îndepărtați sonda cu tamponul (peria) și închideți eprubeta.

Metode de colectare a biomaterialului pentru cercetarea PCR

1.2.1. Razuire. Pentru răzuire, se folosesc sonde sterile de unică folosință cu un tampon de bumbac cu adsorbție crescută sau „perii” mai rar - linguri Volkmann, linguri mici pentru urechi sau instrumente similare cu marginile ușor tocite. Folosind mișcări de răzuire, colectați materialul. Materialul studiat trebuie să conțină cel mai mare număr posibil de celule epiteliale și o cantitate minimă de mucus, sânge și exudat. Adăugați materialul într-un tub Eppendorf steril cu soluție tampon (vezi secțiunea 1.1.).

Razuire din canalul cervical:Înainte de a lua o răzuire, este necesar să îndepărtați excesul de mucus cu un tampon de bumbac steril și să tratați colul uterin cu soluție salină sterilă. Introduceți sonda în canalul cervical la o adâncime de 0,5-1,5 cm, evitând contactul cu pereții vaginului și colectați materialul printr-o mișcare de răzuire (nu până când există sânge). Un număr mic de globule roșii din probă nu afectează rezultatul analizei. În prezența eroziunii cervicale, materialul este preluat de la marginea țesutului sănătos și alterat.

Razuire uretrale: introduceți sonda în uretră (la bărbați - la o adâncime de 2-4 cm) și colectați materialul cu mai multe mișcări de rotație. Cu o zi înainte de preluarea materialului este permisă provocarea (mâncare picant, alcool etc.). Se recomandă să vă abțineți de la urinare timp de 1-2 ore înainte de a preleva proba. Dacă există scurgeri purulente puternice, răzuirea trebuie luată nu mai târziu de 15 minute după urinare.

Razuire conjunctivala luate după anestezierea ochiului cu o soluție de dicaină 0,5%. După ce ați întors pleoapa, utilizați o sondă cu un tampon de vată (sau un bisturiu pentru ochi) pentru a colecta celulele epiteliale din conjunctivă.

Razuire rectala: Introduceți sonda în anus la o adâncime de 3-4 cm și colectați materialul printr-o mișcare de rotație.

1.2.2. Accident vascular cerebral. Folosind o sondă sterilă de unică folosință cu un tampon de vată sau o perie, luați o cantitate mică de scurgere (din bolta vaginală, faringe, nazofaringe etc.) și transferați-o într-un tub Eppendorf steril cu o soluție tampon (vezi secțiunea 1.1.).

1.2.3. Sânge. Pentru studiile PCR, sângele trebuie să fie nativ(nu ondulat).

Colectați sângele în mod aseptic, prin puncție venoasă, într-o eprubetă proprie (2-3 ml) cu anticoagulant EDTA ( Heparina nu poate fi folosită ca anticoagulant!), amestecați ușor, rotind ușor eprubeta.

Sângele cu EDTA este un biomaterial pentru următoarele grupuri de studii:

- cercetare genetică(momentul prelevării de sânge nu contează).

- identificarea agenților infecțioși(cele mai informative sunt probele prelevate în timpul frisoanelor, febrei, adică probabil în timpul viremiei sau bacteriemiei).

1.2.4. Urină. Colectați prima urină sau la mijlocul dimineții într-o cantitate de cel puțin 10 ml într-un recipient steril, gol, cu capac bine înșurubat. Dacă colectarea urinei se efectuează în timpul zilei, atunci înainte de aceasta, pacientul nu trebuie să urineze timp de 1,5-3 ore.

1.2.5. Spută. Dimineața, igienizați gura și gâtul (clătiți cu o soluție de bicarbonat de sodiu). Colectați spută într-o sticlă goală, sterilă, cu gură largă.

1.2.6. Biopsie. Materialul este preluat din zona în care ar trebui să fie localizat agentul infecțios, din țesutul deteriorat sau din zona învecinată cu deteriorarea. Puneți proba de biopsie într-un tub Eppendorf steril cu soluție tampon.

1.2.7. Saliva, suc gastric, lichid cefalorahidian, lichid sinovial. Saliva (1-5 ml), suc gastric (1-5 ml), lichid cefalorahidian (1-1,5 ml) - se pune intr-un tub steril (recipient) gol.

1.2.8. Suc Prostată. După masajul glandei prostatei, sucul este colectat într-o cantitate de 0,5-1 ml într-un tub steril (recipient) gol. Dacă este imposibil să obțineți suc, imediat după masaj, colectați prima porție de urină într-o cantitate de cel mult 10 ml (această porție conține suc de prostată).

1.2.9. Spălări, lavaj bronhoalveolar (BAL). Se utilizează un tampon de bumbac steril și 5-7 ml de soluție fiziologică pentru a clăti, de exemplu, de la vârful unui endoscop sau bronhoscop, și puneți 0,5-5 ml de clătire într-un tub steril (recipient) gol.

1.2.10. Fecale.Înăuntru este plasată o sondă cu un tampon de bumbac fecale si se intoarce usor, captand o cantitate mica de material. Materialul este apoi plasat într-un tub Eppendorf steril care conține o soluție tampon.

CLAMIDIOZA UROGENITALA

Material pentru cercetare Razuirea din uretra sau canalul cervical, secretia de prostata, sedimentul urinar. La nou-născuți, zgârieturi din conjunctiva ochilor și zidul din spate gâturile. La fete, răzuirea vulvei sunt folosite ca material de cercetare, la băieți se folosește urina.

Pregătirea pacientului, luarea material biologicși condițiile de transport al acestuia cu 10 zile înainte de a lua materialul pentru cercetare, trebuie să încetați să luați chimioterapie și proceduri de vindecare.

Caracteristicile prelevarii de material din uretra

• înainte de a lua materialul, pacientul este sfătuit să se abțină de la urinare timp de 1,5-2 ore;
• imediat înainte de a lua materialul, deschiderea externă a uretrei trebuie tratată cu un tampon umezit cu soluție salină sterilă;
• în prezența scurgerii purulente, se recomandă să se efectueze o răzuire la 15-20 de minute după urinare; în absența scurgerii, este necesar să se maseze uretra folosind o sondă pentru a colecta material;
• la femei, înainte de a introduce o sondă în uretră, se masează pe articulația pubiană;
• La femei, sonda este introdusă în uretră la o adâncime de 1,0-1,5 cm, la bărbați - la 3-4 cm, apoi se fac mai multe mișcări de rotație; la copii, materialul pentru cercetare este luat numai din deschiderea externă a uretrei;

Caracteristici de preluare a materialului din canalul cervical

• înainte de a lua materialul, este necesar să îndepărtați mucusul cu un tampon de bumbac și apoi să tratați colul uterin cu soluție salină sterilă;
• sonda se introduce în canalul cervical la o adâncime de 0,5-1,5 cm;
• dacă există eroziuni ale canalului cervical, acestea trebuie tratate cu soluție salină sterilă, iar materialul trebuie luat la limita țesutului sănătos și alterat;
• la scoaterea sondei, este necesar să se evite complet contactul acesteia cu pereții vaginului;

După preluarea materialului, sonda este coborâtă într-o eprubetă cu mediul de transport „DNA-EXPRESS”. După introducerea sondei în mediul de transport, se rotește de mai multe ori și apoi se scoate din tub. Eticheta de testare este închisă și etichetată. Dacă timpul de transport al materialului biologic din momentul colectării până în momentul livrării acestuia în laborator este mai mare de 2 ore, atunci eprubeta trebuie înghețată la -20 0 C. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai în o pungă de frigider. Materialul biologic congelat poate fi păstrat cel mult 2 săptămâni.

Caracteristicile luării secrețiilor de prostată

Înainte de a lua secreții de prostată, capul penisului este tratat cu un tampon de bumbac steril umezit cu soluție salină. Secreția de prostată se preia după masajul preliminar al prostatei prin rect. Terapeutul efectuează un masaj cu presiune folosind mai multe mișcări viguroase de la bază până la vârf. Apoi secreția prostatică este stoarsă din partea cavernoasă. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai într-o pungă frigorifică.

Caracteristicile prelevarii (colectării) urinei

Urina se colectează dimineața pe stomacul gol după somn sau nu mai devreme de 2-3 ore după ultima urinare. Urina de dimineață se stabilește timp de 1 oră, apoi se scurge cu grijă, lăsând doar partea inferioară - aproximativ 10 ml. Acest reziduu este turnat într-un tub de centrifugă și centrifugat. Apoi lichidul supernatant este drenat din nou, iar sedimentul (fără lichid) este transferat cu o sondă într-un tub PCR.

Urina nu trebuie răcită sau înghețată până când nu se obține sediment.

Caracteristici de preluare a materialului din spatele gâtului

O sondă de unică folosință este introdusă în spatele palatului moale în nazofaringe și trecută de-a lungul peretelui din spate al faringelui. După preluarea materialului, sonda este coborâtă într-o eprubetă cu mediul de transport „DNA-EXPRESS”. După introducerea sondei în mediul de transport, se rotește de mai multe ori și apoi se scoate din tub. Tubul este închis și etichetat. Dacă timpul de transport al materialului biologic din momentul colectării până în momentul livrării acestuia în laborator este mai mare de 2 ore, atunci tubul trebuie congelat la -200C. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai într-o pungă frigorifică. Materialul biologic congelat poate fi păstrat cel mult 2 săptămâni.

Caracteristici de preluare a materialului din conjunctiva ochilor

Dacă există scurgeri purulente abundente, se îndepărtează cu un tampon de bumbac steril umezit cu soluție salină. Se ia o răzuire de pe suprafața interioară a pleoapei inferioare deplasându-se spre colțul interior al fisurii palpebrale. Când faci o răzuire, trebuie să ții pleoapa cu mâinile pentru ca atunci când clipești, genele să nu atingă sonda.

După preluarea materialului, sonda este coborâtă într-o eprubetă cu mediul de transport „DNA-EXPRESS”. După introducerea sondei în mediul de transport, se rotește de mai multe ori și apoi se scoate din tub. Tubul de testare este închis ermetic. Dacă timpul de transport al materialului biologic din momentul colectării până în momentul livrării acestuia în laborator este mai mare de 2 ore, atunci tubul trebuie congelat la -200C. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai într-o pungă frigorifică. Materialul biologic congelat poate fi păstrat cel mult 2 săptămâni.

MICOPLASMOZA UROGENITALA

Material pentru cercetare Evacuarea uretrei, vaginului, canalului cervical, urinei (centrifuga porțiunilor prima și mijlocie a dimineții), secreția de prostată, spermatozoizi.

Caracteristici de preluare a materialului din vagin

Materialul trebuie luat înainte de efectuarea unei examinări manuale. Oglinda poate fi umezită înainte de manipulare apa fierbinte, utilizarea antisepticelor pentru tratarea oglinzilor este contraindicată. Secrețiile vaginale se colectează cu o sondă sterilă de unică folosință din fornixul posterior inferior sau din zonele mucoasei modificate patologic și se introduc într-o eprubetă cu mediul de transport „DNA-EXTPESS”. La fete, materialul este preluat din membrana mucoasă a vestibulului vaginal și, în unele cazuri - din fornixul vaginal posterior prin inelele himenale. După introducerea sondei în mediul de transport, se rotește de mai multe ori și apoi se scoate din tub. Tubul este închis și etichetat. Dacă timpul de transport al materialului biologic din momentul colectării până în momentul livrării acestuia în laborator este mai mare de 2 ore, atunci tubul trebuie congelat la -200C. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai într-o pungă frigorifică. Materialul biologic congelat poate fi păstrat cel mult 2 săptămâni.

GONOREE

Material pentru cercetare Evacuarea uretrei, canalului cervical, secretia prostatica, sedimentul urinar.

Pregătirea pacientului, colectarea materialului biologic și condițiile pentru transportul acestuia Vezi chlamydia urogenitală.

Cu 10 zile înainte de a lua material pentru cercetare, trebuie să încetați să luați medicamente pentru chimioterapie și proceduri de tratament. Materialul pentru cercetare la femei trebuie luat înainte de menstruație sau la 1-2 zile după terminarea acesteia. Înainte de a lua materialul, trebuie să vă abțineți de la urinat timp de 3-4 ore și de la actul sexual. Femeile în ajunul examinării nu ar trebui să efectueze toaleta organelor genitale externe și dușuri. Materialul testat trebuie să fie lipsit de sânge. Secrețiile uretrale care curg liber nu trebuie luate pentru examinare. Secreția de prostată trebuie luată numai după terminarea simptomelor acute de prostatita. Pentru gonoreea indolentă și cronică, înainte de studiu trebuie efectuată o provocare.

Metode de provocare pentru gonoree:

• biologic: administrarea de gonovaccină (500 milioane de corpuri microbiene) la adulți o singură dată, intramuscular, la copii peste 3 ani - 100-200 de milioane de corpuri microbiene; Administrarea gonovaccinei nu este recomandată copiilor sub 3 ani;
• termica: se foloseste 3 zile de diatermie cu aranjament abdominal-vaginal-sacral de electrozi 30, 40, 50 de minute sau inductotermie 10, 15, 20 de minute; Cel mai bine este să luați material din uretra și canalul cervical la 1 oră după fiecare încălzire;
• mecanic: aplicarea unui capac metalic pe colul uterin al femeilor timp de 4 ore, efectuarea masajului uretral la bărbați pe bugie timp de 10 minute;
• nutriționale: consumul de alimente sărate, picante și alcool cu ​​24 de ore înainte de test.

Materialul se ia dupa provocare si dupa 24-48-72 ore.

Pentru a obține cele mai fiabile rezultate, sunt necesare studii repetate.

TRIHOMONIAZA

Material pentru cercetare Secreții din uretra (la bărbați), vagin, secreție de prostată.

Pregătirea pacientului, colectarea materialului biologic și condițiile pentru transportul acestuia Vezi chlamydia urogenitală, micoplasmoza urogenitală.

TUBERCULOZA (localizari extrapulmonare)

Material pentru cercetare: Urina, frotiuri din canalul cervical, uretra.

Pregătirea pacientului, luarea materialului biologic și condițiile pentru transportul acestuia cu 10 zile înainte de a lua materialul pentru cercetare, trebuie să încetați să luați chimioterapie și proceduri de tratament. Vezi chlamydia urogenitală.

BOLI RESPIRATORII ASOCIATE CU Mycoplasma pneumoniae

Material pentru cercetare Tampon nazofaringian.

Caracteristicile luării unui frotiu din nazofaringe Un frotiu se face pe stomacul gol sau nu mai devreme de 2-4 ore după masă. La preluarea materialului este necesară o bună iluminare, pacientul se așează lângă sursa de lumină, rădăcina limbii este presată cu o spatulă, materialul este prelevat cu o sondă sterilă fără a atinge limba, mucoasa bucală și dinții și coborât într-un test. tub cu mediul de transport „DNA-EXPRESS”. După preluarea materialului, sonda este coborâtă într-o eprubetă cu mediul de transport „DNA-EXPRESS”. După introducerea sondei în mediul de transport, se rotește de mai multe ori și apoi se scoate din tub. Tubul de testare este închis. Dacă timpul de transport al materialului biologic din momentul colectării până în momentul livrării acestuia în laborator este mai mare de 2 ore, atunci tubul trebuie congelat la -200C. Transportul materialului biologic trebuie efectuat numai într-o pungă frigorifică. Materialul biologic congelat poate fi păstrat cel mult 2 săptămâni.

BOLI GASTRODUODENALE (gastrita, ulcer peptic stomac sau duoden), ASOCIAT CU Helicobacter pylori

Material pentru cercetare Biopsii ale antrului stomacului, biopsii ale duodenului, biopsii ale gingiilor, frotiuri din buzunarul parodontal.

Caracteristicile prelevării materialului de biopsie

Materialul de biopsie este prelevat în timpul unei examinări endoscopice. Înainte de a începe terapia anti-Helicobacter pylori, se prelevează o probă de biopsie din antrul stomacului. La monitorizarea tratamentului, se prelevează o probă de biopsie nu mai devreme de 4 săptămâni după terapia anti-Helicobacter din corpul stomacului. Proba de biopsie prelevată este plasată într-un tub Eppendorf steril și uscat și transportată imediat la laborator. Pentru o depozitare mai lungă, este posibilă înghețarea materialului de biopsie prelevat la o temperatură de -20 0 C.

Caracteristici ale prelevării probelor de biopsie ale gingiilor, frotiuri din buzunarul parodontal și salivă

Materialul de biopsie din gingii, frotiurile din buzunarul parodontal și saliva sunt prelevate de la pacienții cu antecedente de patologie gastroduodenală și prezența gingivitei și a bolii parodontale.

Proba de biopsie prelevată este plasată într-un tub Eppendorf steril și uscat și transportată imediat la laborator. Pentru o depozitare mai lungă, este posibilă înghețarea materialului de biopsie prelevat la o temperatură de -20 0 C.

Frotiurile din buzunarul parodontal sunt colectate într-un tub Eppendorf steril cu soluție salină. În acest caz, eprubetele pot fi păstrate la frigider (+4 0 C - +6 0 C) timp de cel mult 12 ore și sunt transportate într-o pungă frigorifică.

INFECȚII VIRALE

Virusul Herpes Simplex II; Citomegalovirus; H. papiloma virus 16, 18

Material de testare - frotiuri

La infecție herpetică Cel mai bine este să luați răzuit de la leziuni genitale (vezicule, ulcere). În absența leziunilor genitale, se ia o răzuire din canalul cervical. La diagnosticare infecție cu citomegalovirus Materialul pentru cercetare poate fi un frotiu de pe peretele din spate al faringelui, răzuire din vagin, uretra și canalul cervical, saliva, lichidul cefalorahidian. La diagnosticarea infecției cu papilomavirus uman, materialul pentru cercetare poate fi un frotiu din nazofaringe, din conjunctiva ochiului, răzuire din canalul cervical, colul uterin, i.e. mucoase (epiteliu nekeratinizat).

Colectarea materialului biologic Colectarea materialului biologic ar trebui, dacă este posibil, să fie efectuată în perioada de exacerbare a infecției. Vezi chlamydia urogenitală, micoplasmoză urogenitală.

Virusul herpes simplex I; Virusul Herpes Simplex II; Virusul Herpes Simplex VI
Citomegalovirus; Virusul Epstein Barr

Material de testare Sânge nativ.

Pregătirea pacientului, luarea materialului biologic și condițiile pentru transportul acestuia Este recomandabil să se preleveze sânge pentru testare pe stomacul gol.

Sângele venos în cantitate de 1-1,5 ml este luat într-un tub Eppendorf steril de 1,5 ml cu soluție de EDTA. Un tub de sânge poate fi păstrat la frigider (+4 0 C - +6 0 C) timp de cel mult 24 de ore. Nu înghețați eprubeta. Studiul va fi realizat din plasmă și celule sanguine.

HBV-ADN; Determinarea concentrației HBV-ADN prin PCR competitivă
ARN-VHC (evaluare semicantitativă) + anti-VHC; ARN-VHC cu determinarea genotipului anti-HCV HCV+; Hepatita G; TTV-ADN

Material de testat: ser de sânge.

Pregătirea pacientului, luarea materialului biologic și condițiile pentru transportul acestuia Pentru prelevarea sângelui venos și prepararea serului, consultați secțiunea privind determinarea concentrației de hormoni folosind ELISA. Serul care nu conține niciun amestec de globule roșii trebuie testat. Dacă este necesară păstrarea probei de sânge în studiu pentru o perioadă lungă de timp (numai pentru hepatita B, C, G), este necesar să se ia 1 ml de ser sau plasmă sanguină și să o păstreze la o temperatură de -20 0 C pt. nu mai mult de 2 saptamani.

STUDIU CUPRINS PENTRU VAGINOZA BACTERIANĂ

Material de testare: Frotiuri din fornixul vaginal posterior inferior.

Pentru diagnostice complexe vaginoza bacteriana ai nevoie de:
Luați o răzuire a celulelor epiteliale din bolta vaginală posterioară sau laterală pe o lamă separată de sticlă de unică folosință, etichetați-o și uscați-o. Depozitați sticla la temperatura camerei.
Îndepărtați mucusul și luați o răzuire a celulelor epiteliale din fornixul vaginal posterior sau lateral folosind o sondă de tip perie de col uterin de unică folosință într-un tub PCR cu reactivul „DNA-EXPRESS”. Păstrați tubul în congelator la minus 20°C timp de până la 10 zile.
Trimiteți lama și tubul PCR la laboratorul „Litekh” cu o comandă complet completată.

Colectarea materialului biologic și condițiile de transport al acestuia

Consultați specificul prelevarii de material din vagin pentru studii citologice și PCR.

Selecția materialului clinic se efectuează de către personalul medical cu respectarea regulilor regimului antiepidemic, numai cu instrumente sterile de unică folosință (seringi, sonde adecvate, citoperii etc.), purtând mănuși de unică folosință.

Colectați materialul din locusul selectat cât mai complet posibil, folosind aplicatoare adecvate - sonde, citoperie (asigurați adecvarea probei clinice).

Păstrați materialul obținut (ADN/ARN al microorganismelor) folosind medii de transport fiabile și conservanți furnizați de laboratorul PCR. Mediul de transport și depozitare a materialului clinic asigură stabilitatea ARN-ului și ADN-ului la temperatura camerei timp de până la 28 de zile.

Puneți materialul colectat în vacuete cu EDTA (sânge), în tuburi Eppendorf de unică folosință chimic pure ( frotiuri, lichid cefalorahidian, biopsie etc.). Condiția principală la colectarea materialului este de a preveni intrarea ADNazelor și ribonucleazelor în probă, deoarece Ribonucleazele și ADNazele sunt enzime pentru degradarea ARN-ului și ADN-ului. Sunt extrem de stabili în mediu inconjurator, poate rezista la fierbere prelungită. Sursa principală de nucleaze este piele, Particule de praf. Tuburile și vârfurile din plastic trebuie să fie etichetate „DNază, fără RNază”.

Imediat după colectare, închideți ermetic tuburile și sticlele cu material clinic, fără a atinge suprafața interioară a acestora sau suprafața interioară a capacelor.

Când lucrați cu material clinic, când deschideți eprubete, flacoane, nu faceți mișcări bruște și evitați stropirea și stropirea, care pot duce la contaminarea probelor și a suprafețelor de lucru.

Pentru a evita contaminarea reciprocă, depozitați și transportați mostrele într-o pungă de plastic separată sau rafturi. Dacă este necesar transferul probei, utilizați micropipete automate cu vârfuri de unică folosință înlocuibile cu bariere de aerosoli.

Înainte de transportul la laboratorul PCR, biomaterialul selectat trebuie păstrat la o temperatură de 2-4 °C timp de cel mult 48 de ore. Este necesar să se minimizeze timpul de la colectarea probei până la analiza PCR. Transportul probelor se efectuează în pungi frigorifice, recipiente termice, termosuri cu saci termici, gheață sau gheață carbonică.

Sânge, plasmă, ser

Se recomandă recoltarea sângelui folosind sisteme de vid. Introducerea unor astfel de sisteme face posibilă standardizarea manipulărilor cu sânge, are un efect pozitiv asupra tuturor etapelor cercetării de laborator și, în general, transferă munca laboratorului într-o altă, mai mult. nivel inalt calitate. Utilizarea lor garantează protecția personalului împotriva infecțiilor, reduce timpul petrecut cu prelevarea de sânge, este mult mai puțin probabil să fie însoțită de hemoliză și permite păstrarea sterilă a probelor de sânge și transportul ermetic.

Se recomandă efectuarea puncției venoase pe stomacul gol din vena ulnară într-un tub special de vid cu un anticoagulant, după care tubul este inversat pentru amestecare de mai multe ori. Tuburile cu sânge se păstrează la frigider la +4 °C – +8 °C. Perioada maximă de valabilitate a sângelui este de 1 zi (nu congelați!). Dacă este necesară păstrarea pe termen lung, este necesar să luați 1 ml de ser sau plasmă sanguină și să-l păstrați la o temperatură de -16 o -20 o C timp de cel mult 2 săptămâni.

Caracteristicile sistemelor de vid utilizate pentru diagnosticarea PCR:

Vacuete cu EDTA (6%) - utilizate pentru cercetări calitative și cantitative. Anticoagulantul EDTA fixează bine acizii nucleici celulari.

Vacuete cu citrat de sodiu (3,8%) - folosite pentru cercetare calitativa si cantitativa. Nu este potrivit pentru transport pe termen lung, deoarece citratul este un mediu nutritiv bun pentru microflora străină.

Vacuete fără anticoagulante (ser de sânge) - utilizate pentru cercetări calitative. Utilizarea serului de sânge pentru studii cantitative este nedorită, deoarece o parte a agentului infecțios se instalează în cheagul de sânge, reducând astfel posibilitatea de a determina conținutul său cantitativ în sânge.

Vacuetele cu heparină nu sunt absolut potrivite pentru reacțiile PCR. Heparina este un polianion, ca ADN-ul și, prin urmare, concurează cu ADN-ul în reacția PCR.

Reguli pentru colectarea sângelui pentru a determina mutațiile în diagnosticul PCR genelor umane

Sânge pentru diagnosticul PCR. Sângele este prelevat pe stomacul gol din vena ulnară cu un ac de unică folosință (diametrul 0,8-1,1 mm) într-o seringă de unică folosință cu un volum de 2-5 ml și transferat într-o eprubetă cu EDTA sau într-un sistem special de vid precum „Veccuette”. ” (cu EDTA cu capac liliac), eprubeta se inchide cu dop si se intoarce de mai multe ori (a se amesteca cu anticoagulantul).

Înainte de testare, tubul cu sânge se păstrează la frigider la +4°C — +8°C. Perioada maximă de valabilitate: sânge colectat într-un tub cu EDTA, pentru a determina mutații în geneBRCA1/2, poate fi depozitat la+4°С — +8°С 2 zile.

Reguli de recoltare a sângelui pentru testarea PCR - cercetarea infecțiilor

Pentru a obține plasmă, sângele este extras pe stomacul gol sau la 3 ore după masă din vena ulnară cu un ac de unică folosință (diametru 0,8-1,1 mm) într-un sistem special de vid (caps liliac - 6% EDTA). Tubul este acoperit și răsturnat cu grijă de mai multe ori, astfel încât sângele din tub să fie bine amestecat cu anticoagulant (altfel sângele se va coagula și izolarea ADN/ARN va deveni imposibilă).

Heparina nu poate fi folosită ca anticoagulant!

Condiții de depozitare și transport a materialului și a probelor preprocesate

Probe de sânge integral: -la o temperatură de 20-25ºС – timp de 2 ore; -la o temperatura de 2-8ºС – in 6 ore din momentul preluarii materialului pt cuantificare acizi nucleici; în 12 ore – pentru determinarea calitativă a acizilor nucleici;

Congelarea probelor de sânge integral este interzisă!

Colectarea de material pentru PCR a infecțiilor cu HPV

Pentru a testa HPV, este necesar un număr suficient de celule epiteliale, deoarece virusul este un agent intracelular. Prezența moderată a impurităților sub formă de mucus cervical și sânge este acceptabilă. În unele cazuri, este posibil să se ia material folosind o sondă ginecologică universală, dar în acest caz volumul de descărcare de răzuire va fi mai mic, iar numărul de celule poate fi insuficient.

Îndepărtați mucusul și scurgerile vaginale de pe suprafața colului uterin cu un tampon de tifon steril, introduceți partea de lucru a citoperiiului în canalul cervical și faceți două sau trei rotații complete în sensul acelor de ceasornic. Citoperia este îndepărtată și partea sa de lucru, care conține materialul prelevat, este plasată într-o eprubetă cu mediu de transport. Partea de lucru a citoperiei este ruptă pe cel mult 1 cm din baza de plastic a citoperiei și lăsată într-o eprubetă cu mediul de transport.

Dacă este imposibil să rupeți partea de lucru a citoperiei sau a sondei universale, materialul clinic trebuie spălat cât mai complet posibil din partea lor de lucru într-o eprubetă cu un mediu de transport, apăsând-o în interiorul eprubetei și rotindu-se de 5-10 ori în sensul acelor de ceasornic și în sens invers acelor de ceasornic.

Este inacceptabil să folosiți foarfece reutilizabile pentru a tăia partea de lucru a unei citoperii sau a unei sonde universale - acest lucru poate duce la contaminarea încrucișată cu materialul clinic și, în consecință, la rezultate fals pozitive.

Eprubetele cu material biologic se păstrează la congelator la -16°C până la testare.

Colectare de material pentru diagnosticul PCR la bărbați

Răzuire ( frotiu ). Materialul este colectat folosind o sondă universală din uretră. Dacă este necesar, materialul pentru cercetare este preluat din ulcere genitale (test pentru HSV-II). Partea de lucru a sondei care conține materialul de testat este tăiată sau ruptă și plasată într-un tub Eppendorf de unică folosință cu o soluție de conservare sau bine amestecată cu o mișcare de rotație, stoarceți lichidul rămas de pe sondă pe pereții tubului, scoateți sonda (aruncați-o într-un recipient cu o soluție dezinfectantă).

Eprubetele cu material biologic se păstrează la congelator la -18°C până la testare.

Sperma. Colectați într-un tub Eppendorf uscat de unică folosință. Termenul de valabilitate maxim este de 1 zi la frigider la o temperatură de +4°C - +8°C; la -18°С - -20°С nu mai mult de 2 săptămâni.

Suc de prostată . După finalizarea masajului glandei prostatei, suc în cantitate de 0,5-1 ml este colectat într-un tub Eppendorf uscat de unică folosință. Daca este imposibil de obtinut suc, imediat dupa masaj, colecteaza prima portiune de urina (care contine suc de prostata) in cantitate de 10 ml.

Termenul de valabilitate maxim este de 1 zi la frigider la o temperatură de +4°C - +8°C; la -18°С - -20°С nu mai mult de 2 săptămâni.

Un exemplu de procedură de operare standard pentru primirea biomaterialului într-un laborator medical.

Titlul curent:

1 domeniu de utilizare

Această procedură standard de operare (denumită în continuare POS) definește procedura de primire, înregistrare a materialului biologic care intră în laborator din sala de proceduri NUMELE INSTITUȚIEI și alte instituții deservite de laborator, precum și identificarea neconcordanțelor și eliminarea acestora.

Acest SOP este destinat asistentului de laborator și operatorului de laborator.

1. Recomandări metodologice „Organizarea etapei preanalitice în perioada centralizării cercetare de laborator sânge" (Aprobat la conferința științifică și practică din toată Rusia „Servicii reale de laborator de diagnostic clinic: grad de conformitate cu standardele de medicină de laborator, calitate, cost și preț” (Moscova, 2-4 octombrie 2012)
2. GOST R 53079,4─2008. „Tehnologii de laborator medical. Asigurarea calitatii testelor clinice de laborator. Partea 4. Reguli de desfășurare a etapei preanalitice.” A intrat în vigoare la 1 ianuarie 2010.
3. ISO 15189:2012 „Laboratoare medicale. Cerințe de calitate și competență”

3. Organizarea procesului de transport al biomaterialului prin curier și responsabilitatea curierului.

3.1. Temperatura din frigider, care este indicată pe afișajul din interiorul mașinii, este înregistrată de curier în „Jurnalul de contabilitate” regim de temperaturăîn frigiderele auto”, și tot în acest jurnal, curierul indică numele complet, plăcuța de înmatriculare a mașinii și ora în care a fost trimisă mașina pentru biomaterial imediat înainte de deplasarea la instituții. Această revistă se află în biroul Nr.___. (O fotografie a senzorului de temperatură și o fotografie a formularului de jurnal sunt prezentate în Anexa nr. 3).

3.2. Curierul, ajuns la unitatea sanitară, merge la registratura acestei instituții, de unde ridică containere cu diverse biomateriale. Fiecare recipient conține numele instituției și tipul de biomaterial (sânge, urină, fecale, lame cu frotiuri, răzuire). Curierul plasează recipientele orizontal în frigiderul mașinii, așa cum se arată în fotografie.

3.3. Curierul este responsabil pentru integritatea containerelor, siguranța acestora, pentru asigurarea condițiilor corespunzătoare de temperatură în frigiderul mașinii (+4 - +8 o C), precum și pentru siguranța biomaterialului livrat de la instituții către laborator. În timpul călătoriei, curierul monitorizează temperatura din frigiderul mașinii, care este afișată pe un afișaj instalat în interiorul mașinii.

4. Recepția biomaterialului în laborator.

4.1.Temperatura indicată pe afișajul din frigiderul autovehiculului la momentul scoaterii containerelor se notează de către curier în jurnalul „Jurnalul condițiilor de temperatură în frigiderele vehiculului” în coloana corespunzătoare numărului de stare al vehiculului. . Și tot în același jurnal, șoferul indică ora sosirii mașinii cu biomaterial de la instituții.

4.2. Curierul predă recipientele etichetate cu probe de sânge, frotiuri și răzuire asistentului de laborator medical din biroul nr. ___.

4.3. Curierul predă recipientele etichetate cu urină și fecale asistentului de laborator din biroul nr.___.

4.4. În biroul nr. ___, un asistent medical de laborator deschide capacul recipientului și scoate tuburi cu sânge, lame de sticlă cu frotiuri și răzuire și mape cu instrucțiuni de cercetare.

4.5. Asistentul de laborator sortează tuburile de sânge separat în rafturi, după tipul de tuburi (biochimic, hematologic și coagulologic) și denumirile instituțiilor care sunt indicate pe rafturi.

4.6. În biroul nr.____, un asistent medical de laborator preia probe cu urină, fecale și indicații din recipient.

5. Transferul de biomaterial și indicații către departamentele relevante ale laboratorului.

5.1 În cabinetul nr.____, asistentul medical-laborator așează rafturi cu eprubete pentru studii biochimice, imunologice, coagulologice în recipiente marcate „pentru transfer biomaterial” și le duce la biroul nr.___ pentru centrifugare.

5.2 Asistentul de laborator paramedic sună secțiile de hematologie și PCR pentru ca asistenții de laborator paramedic din secțiile relevante să preia biomaterialul din camera nr. ___

5.3. Asistentul medical-laborator transmite trimiteri pentru cercetare de la biroul nr.___ operatorilor din cabinetul nr.____ pentru înregistrare.

5.4 În biroul Nr.___, asistentul medical-laborator transmite indicații operatorilor, care înregistrează formularele în același cabinet.

6. Înregistrarea formularelor de comandă de către operatori.

6.1. Operatorii din biroul nr.___, primind formulare de trimitere de la asistentul medical-laborator din biroul nr.___, îi înregistrează în sistemul informatic al laboratorului.

Procedura de inregistrare:

Operatorul citește codul de bare cu un scanner, lipit pe formularul de direcție;

Apoi operatorul introduce în LIS datele pașaportului pacientului: numele complet, data nașterii, adresa de domiciliu și alte date: sursa comenzii (asigurare medicală obligatorie, asigurare voluntară de sănătate, plată în numerar, examen medical), numărul instituției, departament, complet numele medicului care a dispus examinarea, diagnosticul, codul MES (standard medico-economic).

După aceasta, operatorul introduce în LIS acei indicatori pe care medicul curant i-a prescris și salvează comanda generată în LIS. Formularul de trimitere este prezentat în Anexa nr. 4.

Anexa nr. 2

ÎN Tipuri de neconcordanțe și eliminarea acestora

Anexa nr. 3

Senzor de temperatură frigider al mașinii

În această anexă este de asemenea util să furnizați formularul de jurnal pe care șoferul trebuie să îl completeze.

Următoarele anexe oferă forma formularului de trimitere etc.