Echipamentul și modul de funcționare al laboratorului bacteriologic. laborator bacteriologic. Echipament modern de laborator general necesar pentru funcționarea unui laborator microbiologic

Lucrul cu agenți patogeni ai bolilor infecțioase necesită ca sediul laboratorului să fie situat într-o clădire separată sau să fie izolat de secțiile spitalicești, blocurile alimentare. Laboratoarele de diagnosticare ar trebui să aibă două intrări: una pentru angajați, cealaltă pentru livrarea materialului pentru cercetare. Este permisă primirea materialului prin fereastra de transfer. Spațiile laboratorului sunt împărțite în zone „infecțioase” și „curate” și sunt situate pe parcursul analizei.

Zona „curată” a laboratorului include:

1. Cameră pentru îmbrăcăminte exterioară.
2. Cameră pentru lucrări pregătitoare (camera de pregătire, cameră de spălare pentru prepararea și îmbuteliere medii nutritive etc.)
3. Sterilizarea.
4. O cameră cu frigider pentru depozitarea mediilor de cultură și a preparatelor de diagnostic.
5. Cameră pentru odihnă și masă.
6. Sala de documentare.
7. Camere utilitare.
8. Toaletă.

În zona „infecțioasă” sunt plasate:

1. O cameră pentru primirea și înregistrarea materialului primit pentru cercetare.

3. Săli pentru cercetări bacteriologice.

4.Camere pentru studii serologice.

5. Cameră pentru microscopie luminiscentă.

6. Cameră pentru lucrări zooentomologice.

7.Camera termostatica si autoclav.

Spațiile în care se lucrează cu organisme vii sunt echipate cu lămpi bactericide.

Sarcina laboratorului de microbiologie medicală - diagnosticul bolilor infectioase. Pentru a face acest lucru, agentul patogen este izolat și este determinat răspunsul imun al organismului la introducerea microorganismelor (diagnostic serologic). În plus, efectuați identificarea purtătorilor de microorganisme patogene (patogene). Există laboratoare în care se fac studii virologice. În laboratoarele speciale sanitare și bacteriologice se efectuează studii pentru a identifica gradul de contaminare microbiană a mediului extern și a diverselor obiecte.

sala de laborator concepute pentru a realiza cercetare microbiologică. Ar trebui să fie spațios și luminos. Pereții sunt vopsiți cu vopsea ușoară în ulei, podeaua este acoperită cu linoleum, mesele de laborator sunt acoperite cu plastic sau sticlă, ceea ce este convenabil pentru curățarea umedă și dezinfecția. Sala de laborator este dotată cu mese de lucru pentru medic și asistent de laborator, un loc pentru preparate de colorare, un termostat, un frigider, o centrifugă, un microscop, dulapuri, o chiuvetă cu fierbinte și apă rece, arzatoare pe gaz (in lipsa gazului, functioneaza cu arzatoare cu alcool).

Numărul de săli de laborator este determinat de volumul de muncă al laboratorului. În laboratoarele mari, camere separate sunt alocate pentru lucrul cu diferite tipuri de agenți patogeni.

Desktopul este instalat lângă fereastră, astfel încât lumina să cadă din lateral sau direct. Pe masă se așează un arzător, bucle bacteriologice, borcane cu soluție dezinfectantă și vată.

Înainte de a începe lucrul, tot ce este necesar pentru studiu este așezat pe masă. Arzătorul este instalat la o distanță egală cu antebrațul lucrătorului, adică într-o poziție care exclude mișcările inutile în timpul lucrului. Mărimea flăcării din arzător și strălucirea corectă sunt reglate înainte de a începe lucrul.

Într-un termostat în timpul cercetărilor de rutină, temperatura ar trebui să fie de 37°C. În laboratoarele mari se poate dota o cameră termică specială. Temperatura se inregistreaza zilnic.

Orez. 1 cuptor uscat

Unele medii nutritive, preparate pentru diagnosticare, sânge, bilă etc. se păstrează la frigider.

O centrifugă este utilizată pentru a separa particulele solide dintr-un lichid (de exemplu, eritrocitele din ser).

Rafturile, vasele, mediile nutritive uscate, reactivii etc. sunt păstrate în dulapuri.

Lângă chiuvetă ar trebui să existe un recipient cu o soluție dezinfectantă pentru curățarea mâinilor și o trusă de prim ajutor cu un set de articole pentru primul ajutor.

Boxul este o încăpere strict izolată pentru munca microbiologică în condiții care necesită sterilitate specială. Defertilizarea aerului se realizează cu ajutorul lămpilor bactericide. Alimentarea cutiei cu aer dezinfectat de o anumită temperatură și umiditate prin ventilația de alimentare și evacuare este cel mai bun mod asigura conditiile necesare pentru munca. De obicei, doi oameni lucrează în box. Intră în cutie prin anticameră, în care se schimbă hainele (haine, papuci, șapcă, mască) și merg la cutie pe a doua ușă.

În box, ei nu vorbesc și evită mișcările inutile.

Camera pentru prepararea mediilor de cultură trebuie să fie în apropierea camerei de spălare și sterilizare. Această cameră ar trebui să aibă o chiuvetă cu apă caldă și rece, un distilator, o sobă (gaz sau electrică), dulapuri sau rafturi pentru depozitarea mediului nutritiv uscat, substanțe chimice și vase sterile.

spălat- o cameră pentru spălarea și prelucrarea vaselor, care trebuie să aibă chiuvetă (cu rece și apa fierbinte) și o farfurie. Spalatoria este dotata cu mese, rafturi, dotata cu vase pentru spalat vase: detergenti, zdrenţe, zdrenţe.

În camera de sterilizare există dispozitive pentru sterilizarea vaselor curate, mediilor nutritive și decontaminarea materialelor reziduale: autoclave, dulap de uscare etc.

Dacă există o cameră separată de pregătire, aceasta este utilizată pentru pregătirea, împachetarea vaselor și alte lucrări auxiliare.

În registratura sau în partea din încăpere care o înlocuiește, primesc și înregistrează materialul primit pentru cercetare și emit concluziile cercetării microbiologice.

Vivariu- o cameră pentru păstrarea animalelor de experiment, disponibilă doar în laboratoarele mari.

Toate studiile microbiologice, biochimice și biologice moleculare ale microorganismelor sunt efectuate în laboratoare speciale, a căror structură și echipament depind de obiectele de studiu (bacterii, viruși, ciuperci, protozoare), precum și de orientarea lor țintă (cercetare științifică, diagnosticul bolilor). Studiul răspunsului imun și serodiagnostic al bolilor umane și animale se realizează în laboratoare imunologice și serologice (ser - ser sanguin).

Laboratoarele bacteriologice, virologice, micologice și serologice (imunologice) fac parte din stațiile sanitare și epidemiologice (SES), centrele de diagnostic și spitalele mari. Laboratoarele SES efectuează analize bacteriologice, virologice și serologice ale materialelor obținute de la pacienți și persoane în contact cu aceștia, examinează purtătorii de bacterii și efectuează studii sanitare și microbiologice ale apei, aerului, solului, Produse alimentare etc.

În laboratoarele bacteriologice și serologice ale spitalelor și centrelor de diagnostic, se efectuează cercetări pentru diagnosticarea bolilor intestinale, purulente, respiratorii și alte boli infecțioase, se efectuează controlul microbiologic al sterilizării și dezinfectării.

Diagnosticele mai ales infectii periculoase(ciumă, tularemie, antrax etc.) se desfășoară în laboratoare cu regim special, a căror organizare și funcționare sunt strict reglementate.

Laboratoarele virologice diagnostichează bolile cauzate de viruși (gripa, hepatită, poliomielita etc.), unele bacterii - chlamydia(ornitoza etc.) si rickettsiae(tifus, febră Q etc.). La organizarea și dotarea laboratoarelor de virologie, acestea țin cont de specificul lucrului cu viruși, culturi celulare și embrioni de pui, care necesită cea mai strictă asepsie.

Laboratoarele micologice efectuează diagnosticarea bolilor cauzate de ciuperci patogene, agenți cauzali ai micozelor.

Laboratoarele sunt de obicei situate în mai multe încăperi, a căror zonă este determinată de domeniul de activitate și scopul.

Fiecare laborator are:

a) cutii pentru lucrul cu grupuri individuale de agenți patogeni;

b) incinte pentru cercetări serologice;

c) încăperi pentru spălarea şi sterilizarea vaselor, gătit
medii nutritive leniya;

d) vivarium cu boxe pentru animale sănătoase și de experiență
nyh;

e) registru pentru primirea și eliberarea testelor.

Alături de aceste încăperi, laboratoarele de virologie au cutii pentru prelucrarea specială a materialului de testat și lucrează cu culturi celulare.

Echipamente pentru laboratoare microbiologice

Laboratoarele sunt echipate cu o serie de instrumente și aparate obligatorii.

1. Instrumente pentru microscopie: microscop cu imersiune biologică cu dispozitive suplimentare (iluminator, dispozitiv de contrast de fază, condensator de câmp întunecat etc.), microscop luminiscent.

2. Termostate și frigidere.

3. Aparate pentru prepararea mediilor nutritive, solutii etc.: aparate pentru obtinerea apei distilate (distilator), balante tehnice si analitice, pH-metre, echipamente de filtrare, bai de apa, centrifuge.

4. Un set de instrumente pentru manipularea cu microbi: bucle bacteriologice, spatule, ace, pensete etc.

5. Sticlărie de laborator: eprubete, baloane, vase Petri, saltele, fiole, fiole, pipete Pasteur și gradate etc., aparate pentru confecţionarea tuburilor de bumbac-tifon.

Marile complexe de diagnosticare au analizoare automate și un sistem computerizat de evaluare a informațiilor primite.

Laboratorul are un loc pentru colorarea preparatelor microscopice, unde se gasesc solutii de coloranti speciali, alcool, acizi, hartie de filtru, etc. Fiecare loc de munca este dotat cu un arzator cu gaz sau lampa cu spirt si un recipient cu o solutie dezinfectanta. Pentru munca zilnică, laboratorul trebuie să dispună de mediile nutritive necesare, reactivi chimici, preparate de diagnostic și alte materiale.

Laboratoarele mari au camere termostatice pentru cultivarea în masă a microorganismelor, stabilirea reacțiilor serologice. Pentru cultivarea, depozitarea culturilor, sterilizarea articolelor din sticlă de laborator și alte scopuri, se utilizează următoarele echipamente.

1. Termostat. Un aparat în care se menține o temperatură constantă. Temperatura optimă pentru reproducerea majorității microorganismelor patogene este de 37 "C. Termostatele sunt aer și apă.

2. Microanaerostat. Aparat pentru creșterea microorganismelor în condiții anaerobe.

3. C0 2 - incubator. Un aparat pentru crearea unei temperaturi și a unei atmosfere constante cu o anumită compoziție de gaz. Conceput pentru cultivarea microorganismelor care solicită compoziția gazoasă a atmosferei.

4. Frigidere. Folosit în laboratoarele microbiologice pentru depozitarea culturilor de microorganisme, medii nutritive, sânge, vaccinuri, seruri și alte preparate biologic active la o temperatură de aproximativ 4 °C. Pentru a păstra medicamentele la temperaturi sub 0 ° C, se folosesc frigidere cu temperatură joasă, în care temperatura este menținută la -20 ° C sau -75 ° C.

5. Centrifuge. Se foloseste pentru sedimentarea microorganismelor, eritrocitelor si a altor celule, pentru separarea lichidelor neomogene (emulsii, suspensii). În laboratoare se folosesc centrifuge cu diferite moduri de funcționare.

6. Cabinet de uscare si sterilizare(cuptor Pasteur). Proiectat pentru sterilizarea cu aer uscat a sticlei de laborator din sticlă și a altor materiale rezistente la căldură.

7. Sterilizator cu abur (autoclav). Proiectat pentru sterilizare cu abur supraîncălzit (sub presiune). În laboratoarele de microbiologie se folosesc autoclave de diverse modele (verticală, orizontală, staționară, portabilă).

LABORATOARE BACTERIOLOGICE, VIROLOGICE, MICOLOGICE, IMUNOLOGICE ŞI ECHIPAMENTELE ACESTE. DISPOZITIV DE MICROSCOAPE MODERNE. METODE DE MICROSCOPIE. METODE DE STUDIARE A MORFOLOGIEI MICROORGANISMELOR

Program

1. Reguli de lucru și organizare a laboratoarelor microbiologice (bacteriologice, virologice, micologice).

2. Instrumente și echipamente de bază ale laboratorului de microbiologie.

3. Microscoape și echipamente microscopice. Reguli pentru lucrul cu un microscop de imersie (obiective).

Demonstrație

1. Amenajarea și aplicarea principalelor instrumente și echipamente utilizate în laboratoarele de microbiologie: termostat, centrifuge, autoclavă, dulap de uscare, unelte și ustensile.

2. Dispozitivul unui microscop biologic. Diverse metode de microscopie: câmp întunecat, contrast de fază, luminiscent, electron.

3. Preparate de microbi (drojdii și bacterii) cu diverse metode de microscopie.

Temă către studenți

1. Preparate microscopice și schiță ale ciupercilor asemănătoare drojdiei din gen Candida folosind tipuri diferite microscopie.

Instrucțiuni

Reguli de lucru în laboratoarele microbiologice.

Lucrează într-un laborator microbiologic institutie medicala efectuate cu agenți patogeni ai bolilor infecțioase - microorganisme patogene.

Prin urmare, pentru a se proteja împotriva infecțiilor, personalul trebuie să respecte cu strictețe reglementările interne:

1. Toți angajații trebuie să lucreze în halate medicale, șepci și pantofi detașabili. Intrarea în laborator fără halat de baie este strict interzisă. În cazurile necesare, lucrătorii își pun pe față o mască de tifon. Lucrarea cu microbi deosebit de periculoși este reglementată de instrucțiuni speciale și se desfășoară în laboratoare securizate.

2. Este interzis fumatul si consumul de alimente in laborator.

3. La locul de muncă trebuie păstrat în bună ordine. Lucrările personale ale angajaților trebuie depozitate într-un loc special desemnat.

4. În cazul contactului accidental cu un material infectat pe o masă, podea și alte suprafețe, acest loc trebuie tratat cu atenție cu o soluție dezinfectantă.

5. Depozitarea, monitorizarea culturilor microbiene și distrugerea acestora trebuie efectuate în conformitate cu instrucțiuni speciale. Culturile de microbi patogeni sunt înregistrate într-un jurnal special.

6. La sfârșitul lucrului, mâinile trebuie spălate temeinic și, dacă este necesar, tratate cu o soluție dezinfectantă.

Microscoape și metode de microscopie

Orez. 1.1. Microscoape.

A - forma generala microscop "Biolam"; b — microscop MBR-1: 1 — baza microscopului; 2 - tabel subiect; 3 - șuruburi pentru mutarea mesei cu obiecte; 4 - terminale de presare a preparatului; 5 - condensator; 6 - suport condensator; 7 - șurub, întărirea condensatorului în manșon; 8 - maner pentru deplasarea condensatorului; 9 - mânerul diafragmei iris a condensatorului; 10 - oglinda; 11 - suport tub; 12 - mâner cu șurub macrometric; 13 - mânerul șurubului micrometric; 14 - revolver de obiective; 15 - lentile; 16 - tub înclinat; 17 - șurub pentru fixarea tubului; 18 - ocular.

Pentru studiile microbiologice se folosesc mai multe tipuri de microscoape (biologice, luminiscente, electronice) și metode speciale de microscopie (contrast de fază, câmp întunecat).

În practica microbiologică, se folosesc microscoape de mărci autohtone: MBR-1, MBI-2, MBI-3, MBI-6, "Bio-lam" R-1 etc. (Fig. 1.1). Ele sunt concepute pentru a studia forma, structura, dimensiunea și alte caracteristici ale diverșilor microbi, a căror dimensiune nu este mai mică de 0,2-0,3 microni.

Microscopia prin imersie

Folosit pentru a crește rezoluția metodei microscopie ușoară. Puterea de rezoluție a unui sistem de microscopie optică luminoasă este determinată de lungimea de undă a luminii vizibile și de deschiderea numerică a sistemului. Deschiderea numerică indică mărimea unghiului conului maxim de lumină care intră în lentilă și depinde de proprietățile optice (puterea de refracție) ale mediului dintre obiect și lentila obiectivului. Cufundarea lentilei într-un mediu (ulei mineral, apă) care are un indice de refracție ridicat apropiat de cel al sticlei împiedică împrăștierea luminii din obiect.

Orez. 1.2. Cursul razelor în sistemul de imersie, n este indicele de refracție.

Orez. 1.3. Calea razelor în condensatoarele cu câmp întunecat, a este un condensator-paraboloid; b — condensator cardioid; 1 - lentila; 2 - ulei de imersie; 3 - medicament; 4 - suprafata oglinzii; 5 - diafragma.

Astfel, se obține o creștere a deschiderii numerice și, în consecință, a rezoluției. Pentru microscopia prin imersie se folosesc lentile speciale de imersie, echipate cu etichetă (MI - imersie în ulei, VI - imersie în apă). Rezoluția limită a unui microscop cu imersie nu depășește 0,2 µm. Cursul razelor în sistemul de imersie este prezentat în Fig. 1.2.

Mărirea totală a unui microscop este determinată de produsul dintre mărirea obiectivului și mărirea ocularului. De exemplu, mărirea unui microscop cu un obiectiv de imersie de 90 și un ocular de 10 este: 90 x 10 = 900.

Microscopia în lumină transmisă (microscopie în câmp luminos) folosit pentru studiul obiectelor pătate în preparate fixe.

Microscopie în câmp întunecat. Este utilizat pentru studiul intravital al microbilor din preparatele native necolorate. Microscopia în câmp întunecat se bazează pe fenomenul de difracție a luminii sub iluminarea laterală a particulelor suspendate într-un lichid ( Efectul Tyndall). Efectul se realizează folosind un condensator paraboloid sau cardioid, care înlocuiește un condensator convențional într-un microscop biologic (Fig. 1.3). Cu această metodă de iluminare, doar razele reflectate de la suprafața obiectului intră în lentilă. Ca rezultat, particulele puternic luminoase sunt vizibile pe un fundal întunecat (câmp vizual neluminat). Preparatul în acest caz are forma prezentată în Fig. 1.4, b (pe insert).

Microscopie cu contrast de fază. Conceput pentru studiul medicamentelor native. Dispozitivul de contrast de fază face posibilă vizualizarea obiectelor transparente la microscop. Lumina trece prin diferite structuri biologice la viteze diferite, care depind de densitatea optică a obiectului. Ca urmare, are loc o schimbare a fazei undei luminoase, care nu este percepută de ochi. Dispozitivul de fază, care include un condensator și o lentilă speciale, transformă modificările fazei unei unde luminoase în modificări vizibile ale amplitudinii. Astfel, se realizează o îmbunătățire a diferenței de densitate optică a obiectelor. Ele dobândesc un contrast ridicat, care poate fi pozitiv sau negativ. Contrastul de fază pozitiv se numește o imagine întunecată a unui obiect într-un câmp vizual luminos, negativ - o imagine ușoară a unui obiect pe un fundal întunecat (vezi Fig. 1.4; pe insert).

Pentru microscopia cu contrast de fază, se utilizează un microscop convențional și un dispozitiv suplimentar de contrast de fază KF-1 sau KF-4 (Fig. 1.5), precum și iluminatoare speciale.

Microscopie luminescentă (sau fluorescentă). Pe baza fenomenului de fotoluminiscență.

Luminescență- stralucirea substantelor care apare sub influenta radiatiilor exterioare: lumina, ultravioleta, ionizanta etc. Fotoluminescenta - luminescenta unui obiect sub influenta luminii. Dacă luminezi un obiect luminiscent cu lumină albastră, atunci acesta emite raze de culoare roșie, portocalie, galbenă sau verde. Rezultatul este o imagine color a obiectului.

Orez. 1.5. Dispozitiv de contrast de fază, a - obiective de fază; b - microscop auxiliar; c - condensator de fază.

Lungimea de undă a luminii emise (culoarea luminiscenței) depinde de structura fizico-chimică a substanței luminiscente.

Primar luminiscența obiectelor biologice (proprie, sau bioluminiscență) se observă fără colorare preliminară datorită prezenței propriilor substanțe luminiscente, secundar (indus) - apare ca urmare a colorării preparatelor cu coloranți luminescenți speciali - fluorocromi(acridina portocală, auromină, corifosfină etc.). Microscopia luminescentă are o serie de avantaje față de metodele convenționale: capacitatea de a examina microbii vii și de ai detecta în materialul de testat în concentrații scăzute datorită grad înalt contrast.

În practica de laborator, microscopia fluorescentă este utilizată pe scară largă pentru a identifica și studia mulți microbi.

Microscopia electronică. Vă permite să observați obiecte ale căror dimensiuni depășesc rezoluția unui microscop cu lumină (0,2 microni). Un microscop electronic este folosit pentru a studia virușii, structură fină diverse microorganisme, structuri macromoleculare și alte obiecte submicroscopice. Razele de lumină în astfel de microscoape sunt înlocuite cu un flux de electroni, care, la anumite accelerații, are o lungime de undă de aproximativ 0,005 nm, adică. de aproape 100.000 de ori mai mică decât lungimea de undă a luminii vizibile. Rezoluția mare a microscopului electronic, ajungând la 0,1-0,2 nm, vă permite să obțineți o creștere utilă totală de până la 1.000.000.

Împreună cu dispozitivele de tip „translucid”, folosesc microscoape electronice cu scanare, oferind o imagine în relief a suprafeței obiectului. Puterea de rezoluție a acestor dispozitive este mult mai mică decât cea a microscoapelor electronice de tip „transmisie”.

Reguli pentru lucrul cu microscopul

Lucrul cu orice microscop cu lumină include setarea iluminării corecte a câmpului vizual și pregătirea și microscopia acestuia cu diverse obiective. Iluminarea poate fi naturală (lumina de zi) sau artificială, pentru care se folosesc surse speciale de lumină - iluminatoare de diferite mărci.

Când microscopia preparatelor cu o lentilă de imersie, trebuie să respectați cu strictețe o anumită ordine:

1) se pune o picătură de ulei de imersie pe frotiu preparat și colorat pe lamă și se așează pe masa de lame, fixându-l cu cleme;

2) rotiți revolverul la marcajul obiectivului de imersie 90x sau 100x;

3) coborâți cu grijă tubul microscopului până când lentila este scufundată într-o picătură de ulei;

4) setați focalizarea aproximativă folosind șurubul macrometric;

5) se efectuează focalizarea finală a preparatului cu un șurub micrometru, rotindu-l în interior doar o tură. Nu permiteți lentilei să intre în contact cu
paratomie, deoarece aceasta poate duce la spargerea sticlei de acoperire sau a lentilei frontale a obiectivului (distanța liberă a obiectivului de imersie este de 0,1–1 mm).

La sfârșitul microscopului, îndepărtați uleiul din lentila de imersareși mutați revolverul pe un obiectiv mic 8x.

Pentru microscopia cu câmp întunecat și cu contrast de fază se folosesc preparate native (picătură „zdrobită” etc., vezi subiectul 2.1); microscopat cu un obiectiv de 40x sau un obiectiv special de imersie cu o diafragmă iris care vă permite să reglați diafragma numerică de la 1,25 la 0,85. Grosimea diapozitivelor nu trebuie să depășească 1-1,5 mm, lamelele de acoperire - 0,15-0,2 mm.

Reglementarea condițiilor de muncă cu agenți patogeni ai bolilor infecțioase se face în funcție de gradul de pericol al microorganismelor pentru om. Pe această bază, au fost identificate patru grupuri de agenți biologici patogeni (PBA):

Grupa I: agenți patogeni ai infecțiilor deosebit de periculoase (ciumă, variolă etc.)

Grupa II: agenți patogeni ai bacteriilor, fungice și foarte contagioase infecții virale(antrax, holeră, rabie etc.)

Grupa III: agenți cauzali ai infecțiilor bacteriene, fungice, virale și protozoare identificate ca forme nosologice independente (tuse convulsivă, tetanos, tuberculoză etc.)

Grupa IV: agenți cauzali ai septicemiei bacteriene, fungice, virale, meningite, pneumonii, enterite, infecții toxice, otrăvire acută(Pseudomonas aeruginosa etc.).

Majoritatea laboratoarelor microbiologice lucrează cu PBA grupele III și IV și numai laboratoarele specializate sunt angajate în studiul agenților patogeni ai infecțiilor deosebit de periculoase (grupele I și II).

Laboratoarele de bază care lucrează cu PBA grupele III și IV trebuie să îndeplinească o serie de cerințe (cladire separată sau intrare separată, disponibilitatea sistemelor de alimentare cu apă și electricitate, încălzire, ventilație etc.) și să aibă setul necesar de spații în conformitate cu capacitatea de producție si gama de studii efectuate . Fiecare laborator ar trebui să aibă o zonă „curată” și o zonă „murdară”.

Zona „murdară” cuprinde încăperi pentru recepția și înregistrarea materialului, cutii și încăperi pentru cercetări microbiologice, termostatice, autoclave pentru dezinfecția materialelor. Ferestrele și ușile din toate încăperile trebuie să fie închise ermetic. Camerele de lucru cu microorganisme vii ar trebui să fie echipate cu lămpi bactericide sau să aibă dulapuri de siguranță biologică. Ventilația de alimentare și evacuare a zonei „murdare” trebuie să fie echipată cu filtre fine pentru aerul evacuat. Etichetarea obligatorie a meselor, autoclavelor, recipientelor cu soluții dezinfectante, rafturi pentru material curat și infectat. Laboratorul trebuie să fie echipat cu mobilier special, să aibă podea și pereți netede, rezistente la detergenți și dezinfectanți.

Zona „curată” include spații pentru lucrări preliminare (spălătorie, cameră de pregătire, cameră pentru prepararea și umplerea mediilor nutritive etc.), o cameră pentru lucrul cu documentație, încăperi cu frigidere pentru depozitarea mediilor nutritive și a preparatelor de diagnostic, un dulap. pentru îmbrăcăminte exterioară, o cameră de odihnă. În zona „curată”, este posibil să se lucreze cu PBA neviu (studii serologice, genetice moleculare, biochimice).

Asigurarea siguranței lucrului cu microorganisme patogene include doi factori principali: tehnici și umani. Factorul tehnic este disponibilitatea zonelor „curate” și „murdare”, a echipamentelor, a sistemelor de protecție etc. necesare pentru lucru. Factorul uman este corectitudinea acțiunilor umane pentru asigurarea siguranței, nivelul de competență în echipamentul profesional, cunoașterea posibilelor surse și mecanisme de infectare, pregătire și instruire adecvată.

Munca într-un laborator bacteriologic educațional este, de asemenea, asociată cu doi factori periculoși - microorganisme care provoacă boli infecțioase și foc deschis, care necesită respectarea măsurilor anti-epidemie și de siguranță la incendiu. Elevii trebuie să se familiarizeze cu regulile de siguranță și să le respecte cu strictețe:

Necesar:

Lucrați în halate medicale cu mâneci lungi, șepci medicale și huse de pantofi;

Păstrați lucrurile personale într-un loc special desemnat, lăsați îmbrăcămintea exterioară în vestiar;

Fiecare tip de activitate se desfășoară într-o anumită zonă: lucru cu microorganisme - pe o masă de laborator special echipată, completarea protocoalelor - pe desktop;

În cazul contactului cu material infectat de pe masă, podea și alte obiecte, informați imediat profesorul și dezinfectați;

· Materialele infectate trebuie plasate în recipiente rezistente la apă sau în recipiente cu soluție dezinfectantă, care sunt închise înainte de a fi scoase din laborator.

Ușile laboratorului trebuie ținute închise în timpul lucrului.

La sfârșitul lucrărilor, spălați-vă bine mâinile și, dacă este necesar, tratați cu o soluție dezinfectantă.

mâncând în laborator

trageți lichidul într-o pipetă cu gura

aprinde o lampă duh din alta

purtați o lampă cu alcool arzând

Lăsați lampa cu spirt aprinsă după încheierea utilizării prevăzute

Lăsați preparate nefixate, vase Petri cu culturi și alte ustensile cu material infecțios la locul de muncă

atingeți materialul de testat din vase Petri însămânțate cu mâinile

Laboratorul bacteriologic și regulile de lucru în el. Clasificarea microorganismelor. Morfologia bacteriilor. Metode de determinare a tipului de microbi. metoda bacterioscopică. Tehnica de microscopie cu sistem de imersie

Rezumatul lecției

Medicină și Veterinară

LECȚIA 1 TEMA LECȚIEI: Laboratorul bacteriologic și regulile de lucru în cadrul acestuia. Clasificarea microorganismelor. Morfologia bacteriilor. Metode de determinare a tipului de microbi. metoda bacterioscopică. Tehnica de microscopie cu sistem de imersie. OBIECTIVUL DE ÎNVĂȚARE ESTE...

ACTIVITATEA 1

TEMA LECȚIEI : Laborator bacteriologic și reguli de lucru în el. Clasificarea microorganismelor. Morfologia bacteriilor. Metode de determinare a tipului de microbi. metoda bacterioscopică. Tehnica de microscopie cu sistem de imersie.

OBIECTIVUL ÎNVĂȚĂRII: Familiarizați-vă cu dispozitivul laboratorului bacteriologic și cu regulile de lucru din acesta. Familiarizați-vă cu principiile clasificării microorganismelor. Să studieze caracteristicile morfologice ale bacteriilor și metodele de determinare a tipului de microbi. Să stăpânească metoda bacterioscopică de cercetare și tehnica microscopiei cu sistem de imersie.

OBIECTIVELE LECȚIEI:

1. Familiarizați-vă cu structura laboratorului bacteriologic și cu regulile de lucru din acesta.

2. Familiarizați-vă cu principiile de clasificare a microorganismelor.

3. Să studieze caracteristicile morfologice ale bacteriilor și metodele de determinare a tipului de microbi.

4. Stăpânește tehnica microscopiei cu sistem de imersie.

Dispozitiv de laborator bacteriologic

Laboratorul bacteriologic este destinat studiului materialelor care conțin agenți patogeni infecții bacteriene, pentru determinarea indicatorilor sanitari și microbiologici, controlul stării și intensității imunității specifice și a altor studii microbiologice. Laboratorul bacteriologic trebuie să fie amplasat în încăperi izolate de alte laboratoare cu echipamentul necesar si mobila. Laboratorul ar trebui să aibă o intrare separată, dulap și duș. Laboratorul bacteriologic trebuie să includă următoarele premise:

Cameră pentru primirea și înregistrarea materialelor;

Camere cu box pentru cercetare microbiologică;

Autoclavă;

spălat;

Vivariu.

Camerele de cercetare microbiologică sunt dotate cu termostate, frigidere, centrifuge, cântare, băi de apă și agitatoare electromagnetice. Echipamentul necesar este așezat pe mese. Lucrările cu material infectat se efectuează în cutie cu pre-cutie . La intrarea în cutie trebuie să existe un covoraș îmbibat cu dezinfectant. În cutie, probele primite sunt dezasamblate, frotiurile-amprente sunt pregătite și fixate, inoculările cu microorganisme sunt efectuate pe medii nutritive. Prin urmare, în cutie sunt așezate mese, pe care sunt așezate uneltele necesare muncii: recipiente cu dezinfectanți pentru vase uzate, suporturi pentru eprubete, eprubete și vase Petri cu medii nutritive, pipete sterile, mortare etc., capace, măști și, de asemenea, în dressing ar trebui să existe pantofi înlocuibili. Anticamera poate găzdui termostate, frigidere, centrifuge și alte echipamente. În cutii și pre-cutii, curățarea umedă, dezinfectarea și iradierea cu lămpi bactericide se efectuează zilnic timp de 30-40 de minute înainte și după lucru.

În autoclavă este necesar să existe două autoclave: o autoclavă pentru materiale curate (pentru sterilizarea sticlăriei, mediilor nutritive, instrumentelor); o altă autoclavă pentru materiale infectate (pentru eliminarea instrumentelor și materialelor infectate).

spălat conceput pentru spălarea vaselor. Vasele, pipetele și instrumentele contaminate cu material infectat trebuie spălate numai după sterilizare. Are dulapuri de uscare.

vivariu se referă la spațiile folosite pentru păstrarea animalelor de laborator. Într-un vivarium, este necesar să existe un departament de carantină, camere pentru animale de experiment și sănătoase, încăperi pentru spălarea și dezinfectarea cuștilor, inventar și salopete, o bucătărie pentru pregătirea hranei, o cămară, un furaj și un incinerator. Toate încăperile vivariumului ar trebui să fie izolate una de cealaltă.

Reguli de lucru într-un laborator bacteriologic

Personalul de laborator trebuie să respecte următoarele reguli:

1. Este permis lucrul în haine speciale - halat și pălărie. La box, lucrează în halat steril, mască, șapcă și, dacă este necesar, își pun mănuși și ochelari de cauciuc. Asigurați-vă că schimbați pantofii.

2. Este interzisă părăsirea laboratorului în halate sau purtarea îmbrăcămintei exterioare peste halat.

3. Este interzis fumatul si consumul de alimente in laborator.

4. Tot materialul care intră în laborator pentru analiză trebuie considerat ca fiind infectat. Prin urmare, trebuie să aveți grijă când despachetați materialul. Containerele trebuie șterse la exterior cu o soluție dezinfectantă și așezate pe tăvi sau în cuve.

5. Dacă un material infectat ajunge pe halat, mâini, masă, pantofi, este necesar să se efectueze dezinfecția și să se informeze șeful laboratorului despre aceasta.

6. Materialul infectat trebuie distrus prin autoclavare. Instrumentele, precum și suprafața desktopului după muncă, sunt dezinfectate.

7. Este interzisa scoaterea echipamentelor, inventarului, materialelor din laborator fara dezinfectarea lor prealabila.

8. Pipetele, lamele și lamele și alte ustensile folosite sunt dezinfectate prin scufundarea lor într-o soluție dezinfectantă.

9. La terminarea lucrului, locul de munca este pus in ordine si dezinfectat temeinic. Culturile de microorganisme necesare lucrărilor ulterioare sunt păstrate la frigider.

Laboratorul bacteriologic detine urmatoarea documentatie:

1. Cartea de inventar al tulpinilor muzeale de culturi.

2. Jurnalul mișcării materialelor în laborator.

3. Jurnal de sterilizare și distrugere a materialului infectat.

4. Registrul animalelor de experiment infectate.

5. Jurnal de cercetare (expertiza).

Clasificarea microorganismelor

Clasificare este distribuţia organismelor pe baza contabilizării lor aspecte comuneîn grupuri sau taxoni . Clasificarea se bazează pe semne externe organisme (fenotip) șicaracteristici geneticeorganisme (genotip).

în prezent mIrul microorganismelor este împărțit în următoarele forme:

1. Forme necelulare:

prioni;

Viroidii;

Viruși.

2. Forme celulare:

2.1. Procariote:

Domeniul bacteriilor:

Bacteriile cu perete celular subțire (gram-negative);

Bacteriile cu pereți groși (gram-pozitive);

Bacteriile fără perete celular (micoplasmă).

Domeniul Archaea:

Arhebacterii.

2.2. eucariote:

Protozoare;

Ciuperci.

Clasificarea lumii vii se bazează pe tipul de structură celulară - eucariotă sau procariotă. Principalele diferențe dintre o celulă procariotă (bacteriană) și o celulă eucariotă sunt: ​​absența următoarelor structuri: un nucleu formalizat (adică o membrană nucleară), membrane intracelulare, nucleoli, complexul Golgi, lizozomi, mitocondrii.

Clasificarea microbilor folosește următoarelecategorii taxonomice: regn, diviziune, clasă, ordine, familie, gen, specie. OUnitatea taxonomică principală este specia.Denumirea microorganismelor este atribuită în conformitate cu regulile Codului internațional de nomenclatură al bacteriilor. folosit pentru a desemna specii bacteriene.nomenclatură dublă (binară)., propus în XVIII secol de Carl Linnaeus. Conform nomenclaturii, cu litere latine se scrie mai întâi numele genului (nume generic) și apoi - denumirea speciei (numele speciei). Dacă microorganismul este identificat doar cu genul, atunci cuvântul este scris în loc de numele speciei sp. (specie - vedere). Apartenența generică a unui microb denotă o trăsătură morfologică sau numele omului de știință care a descoperit microbul, iar apartenența la specie denotă fie tipul de colonii, fie habitatul microorganismului. De exemplu, Escherichia coli indică faptul că microbul a fost descoperit de T. Escherich, iar microbul trăiește în intestin.Formarea și utilizarea denumirilor științifice ale microorganismelor sunt reglementate de Codul internațional de nomenclatură al bacteriilor, Codul internațional de nomenclatură botanică (ciuperci), Codul internațional de nomenclatură zoologică (protozoare) și deciziile Comitetului internațional de taxonomie a Viruși.

Bacteriile sunt foarte variabile. Pentru diferențierea intraspecifică a bacteriilor care diferă într-o anumită trăsătură, se folosește conceptul de „variantă” (abreviat ca „var”). Alocați variante care diferă în caracteristicile antigenice ( serovare ), variante rezistente la bacteriofagi ( fagovars ), precum și variante care diferă din punct de vedere biochimic ( chimiovariante ), trăsături biologice sau culturale ( biovaruri).

În microbiologie se folosesc termeni de specialitate: cultură pură, cultură mixtă, tulpină, clonă.

cultură - un set de microorganisme crescute pe un mediu nutritiv dens sau lichid în laborator. Se numește o cultură de microorganisme formată din indivizi din aceeași speciecultură pură. cultura mixtanumit amestec de microorganisme tipuri diferite crescut în mediu nutritiv la însămânțarea materialului studiat sau când alte tipuri de microorganisme din mediul extern pătrund în mediul nutritiv inoculat cu un tip de microb.

Tulpina (stambă germană - apar) - aceasta este o cultură pură a unui anumit tip de microorganism, izolată din materialul studiat, prelevată la un moment dat dintr-un anumit obiect.

Clonă (greacă klon - stratificare) - acesta este descendentul (cultura) unei celule mamă (particulă virală) a unui anumit tip de microorganisme.

Principii de clasificare a microorganismelor

Lista minimă de date necesare pentru a descrie bacteriile include următoarele caracteristici.

1. Proprietăți morfologice și tinctoriale -dimensiune, formă, celule, prezența unei capsule, spori, flageli, capacitatea de a colora cu coloranți.

2. Tipul de respirație – nevoia de oxigen gazos.

3. Proprietăți biochimice -capacitatea de a fermenta carbohidrații, descompune proteinele.

4. Structura antigenică - prezența antigenelor.

5. Sensibilitate la bacteriofagi.

6. Compoziție chimică - conținutul și compoziția carbohidraților, lipidelor, proteinelor.

7. Relația genetică cu alte bacterii.

În microbiologie au fost creați determinanți pentru identificarea microorganismelor: „Cheia bacteriilor și actinomicetelor” de N.A. Krasilnikova (1949), „Determinantul microbilor” de R.A. Ziona (1948) și „Key to Bacteria” de D.Kh. Burgi. Cea mai comună este clasificarea bacteriologului american D.Kh. Burgi.Determinantul lui Bergey sistematizează toate bacteriile cunoscute în 4 secțiuni:

Departamentul I. Gracilicutes (lat. gracilis - grațios, subțire, cutis - piele) - specie cu perete celular subțire, colorat gram-negativ.

Secțiunea II. Firmicutes (lat. firmus - puternic, cutis - piele) - bacterii cu perete celular gros, cu colorație gram-pozitivă.

Secțiunea III. Tenericutes (lat. tener - blând, cutis - piele) - bacterii care nu au perete celular - micoplasma.

Secțiunea IV. Mendosicutes (latină mendosus - incorect, cutis - piele) - arhebacterii. Acest departament includebacterii formatoare de metan, oxidante de sulf, asemănătoare micoplasmei, termoacidofile și alte bacterii cele mai vechi ca origine.

Morfologia bacteriilor

Bacteriile nu sunt vizibile cu ochiul liber. Ele sunt studiate folosind microscoape ușoare și electronice. Celulele bacteriene sunt măsurate în micrometri (1 µm este egal cu 10-3 mm), iar elementele structurii fine a bacteriilor sunt măsurate în nanometri (1 nm este egal cu 10-3 µm). Dimensiunea medie a bacteriilor este de 0,5-3 microni.

Bacteriile sunt împărțite în 3 grupe principale în funcție de forma celulelor:

Forme sferice sau coci;

forme în formă de tijă;

Forme contorte.

coci au o formă sferică sub formă de minge obișnuită, elipsă, fasole. În funcție de poziția relativă a celulelor după diviziune, există următoarele tipuri coci:

micrococi împărțite în planuri diferite și aranjate individual, în perechi sau aleatoriu;

stafilococi împărțit în planuri diferite și aranjate în grupuri;

diplococi împărțit într-un singur plan, aranjat în perechi;

streptococi împărțit într-un singur plan, dispus sub formă de lanț;

Tetracoci împărțit în două plane reciproc perpendiculare, dispuse în patru;

Sarcine se împart în trei planuri reciproc perpendiculare și formează pachete regulate de 8-16 celule.

bacterii în formă de tijăau formă cilindrică cu capete rotunjite, ascuțite sau tocite. Bacteriile în formă de tijă sunt împărțite în 2 grupuri:

bacterii - tije care nu formeaza spori;

bacili - tije care formează spori. Se numesc tije în care diametrul sporilor depășește lățimea celulei vegetative clostridii.

După mărime Bacteriile în formă de tijă sunt împărțite în grupuri:

Mic - până la 1,5 microni;

Dimensiune medie (1,5 - 3 microni);

Mare (mai mult de 3 microni).

După forma capetelor, ele disting:

rotunjite (E. coli);

Tocat (agentul cauzal al antraxului);

Ascuțit (caulobacter);

Îngroșat (agentul cauzal al difteriei);

Split (bifidobacterii).

După poziţia relativă a celulelor:

Localizat aleatoriu (salmonella);

Aranjate în perechi (diplobacteria);

Lanțuri (streptobacterii);

Sub formă de tufă (mycobacterium tuberculosis);

Sub formă de pachete de țigări (agentul cauzal al leprei);

La un unghi (agentul cauzal al difteriei).

Bacteriile contorte combina:

Vibrios - au formă cilindrică curbă, formând 1/2-1/4 din bucla unei spirale, care amintește de o formă de virgulă;

Spirilla au forma de bețe răsucite spiralat cu 4-6 spire;

Spirochetele forme spiralate, în care există 2 tipuri de bobine: bobine primare, formate din coturile cilindrului protoplasmatic, și bobine secundare, reprezentând curbele întregului corp.

Metode de determinare a tipului de microbi

Determinarea tipului de microorganisme se realizează folosind următoarele metode de cercetare:

- metoda bacterioscopică– studiul microorganismelor prin microscopie în stare vie sau colorată;

- metoda bacteriologica– studiul naturii creșterii microbiene pe medii nutritive solide și lichide, determinarea activității enzimatice a microbilor, identificarea microbilor (identificarea speciilor);

- metoda serologica– studiul structurii antigenice a microbilor;

- metoda biologica (experimentala)– studiul proprietăților patogene ale bacteriilor folosind animale de laborator;

- metoda biologică moleculară- studiul caracteristicilor genetice ale microbilor.

Folosind aceste metode, sunt studiate următoarele proprietăți ale microbilor:

- morfologicproprietăți - forma și dimensiunea bacteriilor;

Tinctorial proprietăți - raportul dintre bacterii și coloranți;

Cultural proprietăți - natura creșterii pe medii nutritive;

Biochimic activitate - fermentarea carbohidraților, proteinelor și a altor compuși;

Antigenic structura bacteriilor;

patogenitate;

genetic caracteristicile microbilor.

Metoda de cercetare bacterioscopică

Celulele microorganismelor pot fi studiate atât în ​​stare de viață (metoda picăturii zdrobite și metoda picăturii suspendate), cât și în stare fixă ​​și colorată.

metoda picăturii zdrobite. O picătură de material de testat sau o suspensie de bacterii este aplicată pe suprafața unei lame de sticlă degresată și acoperită cu o lamă. Picătura nu trebuie să depășească marginile lamei. Eșantionul este microscopat cu un obiectiv x40. Metoda picăturii zdrobite este convenabilă pentru studiul mobilității celulelor bacteriene, precum și pentru studiul microorganismelor mari - mucegaiuri, drojdii.

metoda picăturii suspendate. Preparatul se prepară pe un pahar de acoperire, în centrul căruia se aplică o picătură de suspensie bacteriană. Apoi, o lamă de sticlă specială cu o gaură, ale cărei margini sunt pre-lubrificate cu vaselină, este presată pe geamul de acoperire, astfel încât picătura să fie în centrul găurii. Preparatul se întoarce cu susul în jos cu o lamă. Într-un preparat pregătit corespunzător, picătura ar trebui să atârne liber peste puț, fără a-i atinge fundul sau marginile. Pentru microscopie, se folosește mai întâi o lentilă uscată x8, sub a cărei mărire se găsesc marginile picăturii, apoi se instalează lentila x40 și se examinează preparatul.

Prepararea preparatelor fixe. Pentru a prepara medicamentul, se aplică o picătură de apă sau o soluție izotonică de clorură de sodiu pe o lamă de sticlă degresată, în care materialul de testat este introdus cu o buclă bacteriologică și distribuit într-o mișcare circulară a buclei astfel încât să se obțină un frotiu subțire și uniform cu un diametru de 1-1,5 cm. Dacă materialul lichid este examinat, atunci acesta este aplicat pe o lamă de sticlă direct cu o buclă și se prepară un frotiu. Frotiurile sunt uscate la aer.

Pentru fixare folosind metode fizice și chimice. Pentru a repara un frotiu metoda fizica lama de sticlă se trece încet de 3 ori prin flacăra arzătorului. Frotiurile de sânge, frotiurile-amprente ale organelor și țesuturilor sunt fixate printr-o metodă chimică prin scufundarea lor timp de 5-20 de minute în alcool metilic sau etilic, amestecul lui Nikiforov și alte lichide de fixare.

Pentru colorare microbii folosesc metode simple și complexe. La metoda simpla un frotiu fix este colorat cu orice colorant, de exemplu, soluție apoasă fuchsin (1-2 minute) sau albastru de metilen (3-5 minute), spălat cu apă, uscat și microscopat. Tehnicile sofisticate de colorare implică utilizarea secvenţială a mai multor coloranţi. Acest lucru vă permite să identificați anumite structuri celulare și să diferențiați unele tipuri de microorganisme de altele.

Tehnica de microscopie cu sistem de imersie

Pentru examinarea bacterioscopică a microorganismelor se folosesc cel mai des obiectivele de imersie. Spre deosebire de lentilele uscate, la lucrul cu care există aer între preparat și lentila obiectiv, la utilizarea obiectivelor de imersie, între lentila obiectiv și preparat este plasat un lichid, care are un indice de refracție apropiat de cel al sticlei. Rolul unui astfel de lichid este îndeplinit de uleiul de imersie, cel mai adesea - ulei de cedru. Razele de lumină care trec printr-un mediu optic omogen (sticlă și ulei) nu își schimbă direcția. Acest lucru vă permite să îmbunătățiți semnificativ claritatea imaginii. Lentilele de imersiune diferă de lentilele uscate prin design (lentila frontală mobilă) și prin aspect: Rama lor are o tăietură circulară neagră și gravată cu denumirea MI (imersie în ulei).

Microscopia cu obiectiv prin imersiune necesită o bună iluminare a obiectului. Pentru aceasta, se folosește un sistem suplimentar de lentile, situat sub stadiul obiectului - un condensator. La pregătirea microscopului pentru lucru, condensatorul este mutat până la oprire folosind un șurub special. Pe frotiu colorat se aplică o picătură de ulei de imersie și sticla este așezată pe masa cu obiecte. Sub control vizual din lateral, lentila este coborâtă până când vine în contact cu picătura. După ce lentila este scufundată într-o picătură de ulei, contururile obiectului sunt determinate prin rotirea șurubului macrometric și apoi se stabilește o imagine clară a obiectului folosind șurubul micrometric.

După ce microscopia este finalizată, obiectivul de imersie este ridicat, preparatul este îndepărtat, iar lentila frontală a obiectivului este șters de reziduurile de ulei cu o cârpă moale. Apoi lentila este mutată la mărire scăzută sau în poziția neutră și condensatorul este coborât.

Întrebări de control pe tema lecției:

1. Dispozitivul unui laborator bacteriologic.

2. Reguli de lucru într-un laborator bacteriologic.

3. Principii de clasificare a microorganismelor.

4. Forme de celule bacteriene.

5. Metode de determinare a tipului de microbi.

6. Tehnica de microscopie cu sistem de imersie.

Literatură de pregătire pentru lecție:

Literatura principala:

1. Microbiologie medicală, virologie și imunologie. Ed. A.A. Vorobyov. M., 2004.

Literatură suplimentară:

1. L.B. Borisov. Microbiologie medicală, virologie, imunologie. M., 2002.

2. O.K. Pozdeev. Microbiologie medicală. M., GEOTAR-MEDIA, 2005.

3. Microbiologie medicală. Director. Ed. IN SI. Pokrovsky și O.K. Pozdeeva. M., GEOTAR-MED, 1998.

Informatii generale

Laboratoarele bacteriologice ca independente unități structurale organizate la stațiile sanitare și epidemiologice (SES), în spitale de boli infecțioase, spitale tip general, unele spitale specializate (de exemplu, în tuberculoză, reumatologie, dermatovenerologie) și în policlinici.

Laboratoarele bacteriologice de la SES examinează pentru contaminarea bacteriană generală, precum și pentru infecția cu microfloră condiționat patogenă și patogenă, obiectele de mediu: aer, apă, sol, alimente; efectuează sondaje ale echipelor organizate și indivizii asupra transportului bacteriilor patogene ale grupului intestinal, corynebacterium difterie, tuse convulsivă, parapertussis, meningococ. Activitatea laboratorului de microbiologie în colaborare cu alte departamente ale SES are o sarcină specifică - îmbunătățirea mediului și reducerea incidenței populației.

Laboratoarele bacteriologice din instituțiile medicale efectuează analizele necesare stabilirii și clarificării diagnosticului boală infecțioasă, contribuind alegerea potrivita tratamentul specific și determinarea momentului de externare a pacientului din spitalul de boli infecțioase. Subiectele de cercetare în laboratoarele bacteriologice sunt:

• excreții din corpul uman: urină, fecale, spută, puroi, precum și sânge, lichid cefalorahidian și material cadaveric;
• obiecte de mediu: apă, aer, sol, alimente, spălări din obiecte de inventar, mâini etc.

Sala de laborator bacteriologic si echipamente la locul de munca

Specificul muncii microbiologice impune ca camera alocată laboratorului să fie izolată de secțiile de spital, camerele de zi și blocurile alimentare. Laboratorul bacteriologic cuprinde: săli de laborator pentru cercetări bacteriologice și săli de utilitate; autoclavă sau sterilizare pentru dezinfecția deșeurilor și a ustensilelor contaminate; spălat, echipat pentru spălat vase; sredovovarochnaya pentru prepararea, îmbutelierea, sterilizarea și depozitarea mediilor de cultură; vivarium pentru păstrarea animalelor de experiment; material pentru depozitarea reactivilor de rezervă, ustensilelor, echipamentelor și echipamentelor de uz casnic.

Camerele de utilitate enumerate, ca unități structurale independente, fac parte din mari laboratoare bacteriologice. În laboratoarele mici, camerele de gătit și sterilizare sunt combinate într-o singură cameră; nu există încăpere specială pentru păstrarea animalelor de experiment.

Sub sălile de laborator, în care se desfășoară toate cercetările bacteriologice, sunt alocate cele mai luminoase și mai spațioase încăperi. Peretii din aceste incaperi la inaltimea de 170 cm fata de podea sunt vopsiti in culori deschise cu vopsea in ulei. Podeaua este acoperită cu relin sau linoleum. Acest tip de finisaj vă permite să utilizați soluții dezinfectante atunci când curățați camera.

Fiecare cameră ar trebui să aibă o chiuvetă cu instalații sanitare și un raft pentru o sticlă de soluție dezinfectantă.

Într-una din încăperi este dotată o cutie vitrata cu pre-cutie pentru a efectua lucrări în condiții aseptice. La box au pus o masă pentru culturi, un scaun, lămpi bactericide sunt montate deasupra locului de muncă. Un dulap pentru depozitarea materialului steril este plasat în pre-cutie. Sala de laborator este dotată cu mese de tip laborator, dulapuri și rafturi pentru depozitarea echipamentelor, ustensilelor, vopselelor și reactivilor necesari lucrului.

Foarte mare importanță pentru munca are organizarea corecta a locului de munca a unui medic - bacteriolog si asistent de laborator. Mesele de laborator sunt instalate lângă ferestre. Când le plasați, trebuie să vă străduiți să vă asigurați că lumina cade în față sau în lateralul lucrătorului, de preferință pe partea stângă, dar în niciun caz din spate. Este de dorit ca încăperile de analiză, în special pentru microscopie, să aibă ferestre orientate spre nord sau nord-vest, deoarece este nevoie de lumină difuză egală pentru lucru. Iluminarea suprafeței meselor pentru lucru ar trebui să fie de 500 de lux. Pentru confortul dezinfectării, suprafața meselor de laborator este acoperită cu plastic, iar fiecare loc de muncă de pe el este acoperit cu sticlă oglindă.

Fiecărui angajat al laboratorului i se atribuie un loc de muncă separat cu o suprafață de 150 × 60 cm Toate locurile de muncă sunt echipate cu articole necesare pentru munca zilnică.

Reguli de lucru și comportament în laborator

O caracteristică a muncii bacteriologice este contactul constant al personalului de laborator cu materialul infecțios, culturile de microbi patogeni, animalele infectate, sângele și secrețiile pacientului. Prin urmare, toți angajații laboratorului bacteriologic sunt obligați să respecte următoarele reguli de lucru, care asigură sterilitatea în muncă și previne posibilitatea infecțiilor intralaboratoare:

1. Este imposibil să intrați în incinta laboratorului bacteriologic fără îmbrăcăminte specială - un halat și o șapcă sau o eșarfă albă.
2. Nu aduceți obiecte străine în laborator.
3. Este interzisă părăsirea laboratorului în haine sau a pune un pardesiu pe o haină.
4. Este strict interzis fumatul, mâncatul, depozitarea alimentelor în incinta laboratorului bacteriologic.
5. Toate materialele care intră în laborator trebuie considerate ca fiind infectate.
6. La despachetarea materialului infecțios trimis trebuie avută grijă: borcanele care conțin materialul pentru cercetare se șterg pe exterior cu o soluție dezinfectantă și se pun nu direct pe masă, ci pe tăvi sau în cuve.
7. Transfuzia de lichide care conțin microbi patogeni se efectuează peste un vas umplut cu o soluție dezinfectantă.
8. Cazurile de accidente cu articole din sticlă care conțin material infecțios sau scurgeri de material infecțios lichid trebuie raportate imediat șefului laboratorului sau adjunctului acestuia. Măsurile de dezinfecție a părților corpului contaminate cu material patogen al rochiei, articolelor de la locul de muncă și suprafețelor sunt efectuate imediat.
9. Când se studiază materialul infecțios și se lucrează cu culturi patogene de microbi, este necesar să se respecte cu strictețe metodele tehnice general acceptate în practica bacteriologică, care exclud posibilitatea contactului mâinilor cu materialul infecțios.
10. Materialul infectat și culturile inutile trebuie distruse, dacă este posibil în aceeași zi. Uneltele utilizate în lucrul cu material infecțios sunt dezinfectate imediat după utilizare, precum și suprafața locului de muncă.
11. Atunci când se efectuează lucrări bacteriologice, este necesar să se monitorizeze cu strictețe curățenia mâinilor: la sfârșitul lucrului cu material infecțios, acestea sunt dezinfectate. Locul de muncă la sfârșitul zilei este pus în ordine și dezinfectat temeinic, iar materialul infecțios și culturile de microbi necesare lucrărilor ulterioare sunt depozitate într-un frigider care se încuie sau în seif.
12. Angajații unui laborator bacteriologic sunt supuși vaccinării obligatorii împotriva acelor boli infecțioase, ai căror agenți cauzali se găsesc în obiectele studiate.

Curatenie camera de laborator

Laboratorul de microbiologie trebuie menținut curat. Instalațiile de laborator trebuie curățate în mod regulat. Este foarte dificil și nu întotdeauna necesar să se asigure sterilitatea completă a laboratorului, dar este posibilă reducerea semnificativă a numărului de microorganisme din aer și pe diferite suprafețe din sălile de laborator. Acest lucru se realizează prin aplicarea practică a metodelor de dezinfecție, adică distrugerea agenților patogeni ai bolilor infecțioase din obiectele de mediu.

Podea, pereti si mobilier in laboratorul de microbiologie se aspira si se sterg cu diverse solutii dezinfectante. Aspirarea asigură că obiectele sunt libere de praf și o cantitate semnificativă de microorganisme sunt îndepărtate din ele. S-a stabilit că, cu o periere de 4 ori a unui aspirator pe suprafața unui obiect, aproximativ 47% dintre microorganismele sunt îndepărtate de pe acesta, iar cu 12 ori - până la 97%. Cel mai adesea, o soluție de 2-3% de sodă (bicarbonat de sodiu) sau lizol (un preparat fenol cu ​​adaos de săpun verde), o soluție apoasă de 0,5-3% de cloramină și alți dezinfectanți sunt utilizate ca soluții dezinfectante.

Aerîn laborator, cel mai ușor este dezinfectat prin ventilație. Aerisirea prelungită a încăperii prin fereastră (cel puțin 30-60 de minute) duce la scădere bruscă numărul de microorganisme din aer, mai ales când există o diferență semnificativă de temperatură între aerul exterior și cel din interior. O metodă mai eficientă și mai frecvent utilizată de dezinfecție a aerului este iradierea cu raze UV ​​cu o lungime de undă de 200 până la 400 nm. Aceste raze sunt puternice activitate antimicrobianăși poate provoca moartea nu numai a celulelor vegetative, ci și a sporilor de microorganisme.

Literatură

Fundația Wikimedia. 2010 .

Vedeți ce este „Laboratorul bacteriologic” în alte dicționare:

1) o instituție de învățământ, științific, practică, industrială sau o subdiviziune a unei astfel de instituții, întreprinderi, care efectuează cercetări experimentale, de control sau analitice; 2) sala în care se efectuează studiile indicate. LA… … Dicţionar de microbiologie

L. ca parte a unei stații sanitar-epidemiologice sau de diagnostic clinic L., destinată studiilor microbiologice (bacteriologice, imunologice etc.) în vederea identificării agenților patogeni, clarificării diagnosticului și... Dicţionar medical mare

Acest articol sau secțiune necesită revizuire. Vă rugăm să îmbunătățiți articolul în conformitate cu regulile de scriere a articolelor. Laborator de cercetare laborator pentru experimente și cercetare științifică oameni de știință și... Enciclopedia medicală Wikipedia

Prof. Leffler (Loeffler) a descris în 1892 epizootia observată de el la Greifswald printre șoareci albi destinați diferitelor experimente. Agentul cauzal al acestei epizootii din studiu s-a dovedit a fi un microorganism specific, pe care Leffler și ... ... Dicţionar enciclopedic F. Brockhaus și I.A. Efron

Instituţii de sănătate sau unități structurale terapeutice şi profilactice sau sanitare institutii preventive concepute pentru diverse cercetări medicale. Acest grup nu include științifice ...... Enciclopedia medicală